細胞色素C

還原型為分散的針狀結晶，氧化型系花瓣狀結晶，二者均易溶於水及酸性溶液，前者水溶液呈桃紅色，後者呈深紅色。對熱都較穩定。而前者較後者更穩定些，分子量約11000-13000。臨床上用於各種組織缺氧急救的輔助治療，如一氧化碳中毒、催眠藥中毒、氰化物中毒、新生兒窒息、嚴重休克期缺氧、腦血管意外、腦震盪後遺症、麻醉及肺部疾病引起的呼吸困難和各種心臟疾患引起的心肌缺氧的治療。

基本介紹

• 中文名：細胞色素C
• 外文名：Cytochrome C
• CAS號：酶促作用
• 分子量：884.88700
• 分子式：C42H52FeN8O6S2
• 外觀與性狀：棕色-紅色結晶粉末

化合物簡介

概況

本品為生物氧化過程中的電子傳遞體。其作用原理為在酶存在的情況下，對組織的氧化、還原有迅速的促酶作用。通常外源性細胞色素C不能進入健康細胞，但在缺氧時，細胞膜的通透性增加，細胞色素C便有可能進入細胞及線粒體內，增強細胞氧化，能提高氧的利用。

來自三羧酸循環中產生的琥珀酸輔酶A，其肽鏈僅有104個胺基酸，體內大量存在，一般無需外源補充；且外源補充與體內含量相比甚微。細胞色素C是生物氧化的一個非常重要的電子傳遞體，線上粒體嵴上與其它氧化酶排列成呼吸鏈，參與細胞呼吸過程。

基本信息

中文名稱：細胞色素C

中文別名：肌高鐵血紅素;細胞色素丙;細胞血素C;

英文名稱：Cytochrome C

英文別名：Cytomac P;Cytochromert;myohematin;cytorest;Cytor-est;CYT-C;Cytochrome C (horse heart); Cytochrome c from horse heart; cytochrome C from pigeon breast muscle; cytochrome C from chicken heart; cytochrome C from porcine heart; cytochrome C from tuna heart; cytochrome C from bovine heart; cytochrome C from sheep heart; cytochrome C from saccharomyces*cerevisiae; cytochrome C practical grade: from*bovine heart; cytochrome C from dog heart; cytochrome C peptide map control; cytochrome C from rat heart; cytochrome C from rabbit heart; cytochrome C from bison heart; Cytochrome c, Equine Heart; Cytochrome (bovine heart); Cytochrome鎐 equine heart; Cytochrome鎐 from pigeon breast muscle; CYTOCHROME-C

CAS號：9007-43-6

EINECS 232-700-9

分子式：C₄₂H₅₂FeN₈O₆S₂

結構式：

分子量：884.88700

精確質量：884.28000

PSA：286.03000

LogP：3.85300

物化性質

外觀與性狀：棕色-紅色結晶粉末

熔點：300ºC

沸點：1323.5ºC at 760 mmHg

閃點：754.2ºC

穩定性：Oxidizes when exposed to air.

儲存條件：-20ºC

安全信息

海關編碼：3507909000

WGK Germany：3

安全說明：S24/25

RTECS號：HA5365000

危險品標誌：Xi; Xn

合成方法

1.將新鮮或冷凍豬心，洗淨，去血塊、脂肪和肌腱等，切條，用絞肉機絞碎。然後加入1.5倍的水，用1mol/L的硫酸調節pH值為4左右，常溫下攪拌，浸提2h，壓濾。濾液用1mol/L的氨水中和至pH=6.2，離心分離取清液。殘渣再用等量水重複提取一次，合併兩次提取液。提取液用2mol/L氨水調pH值為7.5，靜止沉澱雜蛋白，離心，吸取上層清液。然後按每升提取液加入10g沸石，在不斷攪拌下充分吸附40min，靜置，棄去上層清液。用蒸餾水洗滌吸附有細胞色素C的沸石3次，用0.2%的氯化鈉洗滌4次，再用蒸餾水洗至洗滌液澄清。過濾沸石，抽乾，裝入色譜柱中，並用25%的硫酸銨溶液洗脫，收集洗脫液。洗脫液中加入固體硫酸銨使濃度達45%，雜蛋白完全析出，過濾。濾液中緩慢加入三氯乙酸（20%）溶液，邊加邊攪拌，待細胞色素C沉澱完全析出後，離心收集沉澱。將沉澱溶於蒸餾水，用水透析至無硫酸根離子。將透析後溶液通過已處理好的Amberlite IRC50（NH+4）樹脂柱吸附，用水洗滌至澄清，再用磷酸氫二鈉（0.6mol/L)和氯化鈉(0.4mol/L)混合液洗脫，洗脫速要慢，一般流速為2ml/min。洗脫液再用蒸餾水透析至無氯離子為止，可得細胞色素C精品溶液。收率為100～150mg/kg，含量大於20mg/ml。

2.以新鮮酵母為原料的提取法

用途

1.細胞呼吸激活藥。對組織中細胞的氧化、還原過程具有迅速的酶促作用。用於急救或輔助治療中因各種原因引起的組織缺氧。對抗癌藥物引起的白血球降低，四肢循環障礙，肝疾患，腎炎亦有一定的治療作用。

2.適用於治療由腦缺氧、心肌缺氧和其他組織缺氧引起的一系列症狀。本品尚能促進受損肝細胞再生、骨髓造血機能修復，顯著減輕由放療引起的白細胞減少症。

細胞色素C溶液藥典標準

來源含量

本品系自豬或牛心中提取的細胞色素C的水溶液。每1ml中含細胞色素C不得少於15mg。

製法要求

本品應從檢疫合格的豬或牛心中提取，生產過程應符合現行版《藥品生產質量管理規範》的要求。

性狀

本品為深紅色的澄清液體。

鑑別

（1）取含鐵量項下的供試品溶液1ml，滴加20%三氯醋酸溶液，即生成棕色或棕紅色的凝乳狀沉澱，溶液的紅色消失。沉澱能在水中溶解，溶液顯棕紅色。

（2）取含鐵量項下的供試品溶液1ml，置50ml量瓶中，用磷酸鹽緩衝液（取磷酸二氫鈉1.38g與磷酸氫二鈉31.2g，加水適量使溶解成1000ml，調節pH值至7.3）稀釋至刻度，加連二亞硫酸鈉約15mg，搖勻，照紫外－可見分光光度法（2010年版藥典二部附錄ⅣA）測定，在520nm與550nm的波長處有最大吸收，在535nm的波長處有最小吸收。

檢查

含鐵量--標準鐵溶液的製備

取硫酸鐵銨50g，加水300ml與硫酸6ml的混合液溶解後，加水適量使成1000ml，搖勻。精密量取25ml，置碘瓶中，加鹽酸5ml，混合，加碘化鉀試液12ml，密塞，靜置10分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，至近終點時，加澱粉指示液1ml，繼續滴定至藍色消失。每1ml硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當於5.585mg的Fe。根據硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）消耗的量（ml），計算每1ml中含Fe量（mg）。精密量取適量，加硫酸稀釋液（取稀硫酸2ml，用水稀釋至500ml）製成每1ml中含23μg的Fe。

供試品溶液的製備

精密量取本品適量（約相當於細胞色素C 100mg），置10ml量瓶中，用水稀釋至刻度。

測定法

精密量取供試品溶液5ml，置已熾灼至恆重的坩堝中，蒸乾，在105℃乾燥至恆重，精密稱定重量W1，緩緩熾灼至完全炭化後，繼續在500～600℃熾灼使完全灰化並恆重，精密稱定重量W2。另精密量取供試品溶液1ml，置25ml量瓶中，加30%過氧化氫溶液0.7ml與稀硫酸0.5ml，置水浴中，加熱30分鐘，取出，放冷，精密加入聯吡啶試液2ml，置冷水浴中，緩緩加入亞硫酸鈉試液5ml，隨加隨振搖，置60～70℃水浴中，加熱30分鐘，取出，放冷至室溫，用水稀釋至刻度，搖勻，照紫外－可見分光光度法（2010年版藥典二部附錄Ⅳ A），在522nm的波長處測定吸光度A1，另精密量取標準鐵溶液2ml，置25ml量瓶中，照上述方法，自“加30%過氧化氫溶液0.7ml”起，依法操作，測定吸光度A2，按下式計算，含鐵量應為0.40%～0.46%。

細菌內毒素

取本品，依法檢查（2010年版藥典二部附錄ⅪE），每1mg細胞色素C中含內毒素的量應小於5.0EU。

過敏反應

取本品適量，加注射用水稀釋成每1ml中含細胞色素C 7.5mg的溶液，作為供試品溶液，依法檢查（2010年版藥典二部附錄Ⅺ K），應符合規定。

活力

照細胞色素C活力測定法（2010年版藥典二部附錄ⅫB）測定，不得低於95.0%。

含量測定

精密量取含鐵量項下的供試品溶液1ml，置50ml量瓶中，用鑑別（2）項下的磷酸鹽緩衝液稀釋至刻度，加連二亞硫酸鈉約15mg，搖勻，照紫外－可見分光光度法（2010年版藥典二部附錄Ⅳ A），在約550nm的波長處，以間隔0.5nm找出最大吸收波長，測定吸光度，按細胞色素C的吸收係數（E）為23.0計算，即得。

製劑

（1）細胞色素C注射液 （2）注射用細胞色素C

藥物分析

方法名稱：

細胞色素C注射液—細胞色素C的測定—分光光度法

套用範圍：

本方法採用分光光度法測定細胞色素C注射液中細胞色素C的含量。

本方法適用於細胞色素C注射液。

方法原理：

取本品適量，加磷酸鹽緩衝液溶解並定容，再加連二亞硫酸鈉，用紫外-可見分光光度法測定吸光度，按細胞色素C的吸收係數（E1m）為23.0計算，即得。

試劑：

1.連二亞硫酸鈉

2.磷酸鹽緩衝液

儀器設備：

可見分光光度計

試樣製備：

供試品溶液的製備

精密量取本品1mL，作為即得供試品溶液。

註：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

藥理作用

細胞色素C系從豬或牛心中提取而得，為生物氧化過程中的電子傳遞體。作用與輔酶相似。當組織缺氧時，細胞通透性增高，注射用藥後，細胞色素C可進入細胞內起到矯正細胞呼吸與促進物質代謝的作用。

本品為細胞呼吸激活酶，作為組織缺氧治療的急救用藥和輔助藥物,如一氧化碳中毒，安眠藥中毒，初生兒假死，不可逆休克期缺氧，麻醉前的處理；肺炎，肺癌，矽肺，肺氣腫，支氣管擴張所引起的呼吸困難，高山病缺氧，腦血管障礙，腦外傷，腦出血，腦動脈硬化症，腦震盪後遺症,乙型腦炎後遺症，百日咳腦病等等引起的腦缺氧；中毒性心肌損害,心肌炎,心肌代償不全,心絞痛，白喉性心肌炎，心肌梗塞等;對抗癌藥物所引起的白血球的降低，四肢循環障礙，神經麻痹症,肝病,腎炎也有改善作用。

誘導細胞凋亡

有關細胞凋亡的研究表明，細胞色素C與細胞凋亡有關，從線粒體中泄露出的細胞色素C有誘導細胞凋亡的作用。

藥代動力學

細胞色素C注射後，大部分被缺氧組織利用。少部分分布於心臟組織中，逐漸經肝、腎還原，由尿排出。

適應症

細胞色素C為細胞呼吸激活藥，用於各種組織缺氧的急救或輔助治療，如一氧化碳中毒、中樞抑制藥（催眠藥）中毒、新生兒窒息、嚴重休克期缺氧、麻醉及肺部疾病引起的呼吸困難、高山缺氧、腦缺氧及心臟疾病引起的缺氧等，但療效有時不顯著。在國外，細胞色素C是某些治療白內障的眼藥的成分，但其作用不清楚。

禁忌證

1.對細胞色素C過敏者。

2.用藥前應作過敏試驗，陽性反應者禁用。

用量用法

1. 肌註：成人每次15mg，每日1次，病重者每次30mg，每日2次，更嚴重者可酌情增加。兒童用量酌減。

2. 靜註：每次15～30mg，每日1～2次，加25%葡萄糖液20ml混勻後，緩慢注射；亦可用5%～10%葡萄糖液或等滲鹽水等稀釋後靜滴。

3. 粉針（凍乾型）目前用25%葡萄糖液20ml或5%葡萄糖液或滅菌等滲鹽水溶解後滴注。

注意事項

1.可引起過敏反應，用藥前需作過敏試驗。

2.當停用後再用時，應再作過敏試驗，陽性者禁用。

3.治療中若一經停藥，再用藥時易發生休克，如發生休克，用升壓藥，強心藥，抗組織胺藥，腎上腺皮質素處理.

4.對缺氧治療應採取綜合措施。

不良反應

1.可引起過敏反應，用前需作過敏試驗。

2.有局部痙攣、皮疹、發熱、口渴及暫時性休克等反應。

專家點評

細胞色素C用於各種組織缺氧的急救或輔助治療，如一氧化化碳及催眠藥中毒，新生兒窒息、腦外傷等各種原因引起的腦缺氧等。對抗癌藥物引起的白細胞降低，四肢循環障礙，肝臟疾患和腎炎亦有一定改善作用。

細胞色素

細胞色素種類較多，可以用光譜學、血紅素基團的精確結構、抑制劑的敏感度以及還原電勢的大小來分辨。

根據輔基的不同，可以將細胞色素大致分為三類：

分類輔基

細胞色素a 血紅素a（原血紅素）

細胞色素b血紅素b（甲醯血紅素）

細胞色素d 二氫卟酚（Chlorin）的衍生物[1]

細胞色素c不是根據輔基來命名；與其他三類細胞色素非共價結合血紅素不同的是，細胞色素c通過分子中的半胱氨酸巰基與血紅素共價結合。[2]細胞色素e尚無，但有細胞色素f（細胞色素c中的一種）。[3]此外，細胞色素d僅存在於細菌中。

線上粒體和葉綠體中，細胞色素常常結合在電子傳遞和相關代謝途徑的複合物酶中。

關係判斷

親緣關係越近的生物，其細胞色素C越相似或相同。比如人和黑猩猩。而如果在進化史上相去甚遠，則其細胞色素C也相差越遠，比如人和酵母菌。

鑒於細胞色素C分子在呼吸電子傳遞鏈中不可或缺的地位，其分子結構是相對保守的。但隨著生物的進化，其分子組成結構也必將出現變異，只是相對於其他蛋白來說，細胞色素C分子的很多變異可能導致生物體的電子傳遞出現問題而導致死亡，因此，其分子進化要緩慢而保守。