《細胞壁分選酶介導嗜酸乳桿菌的黏附效應研究》是依託寧波大學，由吳振擔任負責人的國家自然科學基金資助青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：細胞壁分選酶介導嗜酸乳桿菌的黏附效應研究
- 依託單位：寧波大學
- 項目負責人：吳振
- 項目類別：青年科學基金項目
項目簡介,結題摘要,
項目簡介
作為定植人類胃腸道中的一類主導菌種，益生性乳酸菌已被廣泛套用於發酵乳製品中。同時，益生性乳酸菌可以通過表面蛋白黏附於小腸黏膜層，維持腸道微環境的穩態。在整個黏附過程中，一類稱為分選酶（Srt）的膜結合的轉肽酶在催化分選酶相關的表面蛋白（SDPs）在細胞壁上的錨定中發揮著重要作用。針對分選酶Srt介導的黏附效應研究，國內外研究者主要側重於其在致病菌中的功能特性，而對乳酸菌分選酶Srt的酶學活性及在乳酸菌SDPs功能特性發揮方面的研究報導相對匱乏。本項目通過分選酶Srt體外重組表達，分析其酶學特性；基因敲除結合蛋白組學技術探討嗜酸乳桿菌分選酶Srt對SDPs蛋白的調控機理；在此基礎上進一步分析野生菌株，ΔSrt菌株，分選酶Srt高表達菌株（Srt-up），分選酶Srt低表達菌株（Srt-down）在黏附效應方面的差異，以期闡明分選酶Srt對嗜酸乳桿菌黏附效應的影響機理。
結題摘要
作為定植人類胃腸道中的一類主導菌種，益生性乳酸菌已被廣泛套用於發酵乳製品中。同時，益生性乳酸菌可以通過表面蛋白黏附於小腸黏膜層，維持腸道微環境的穩態。本項目研究表明，在嗜酸乳桿菌的黏附過程中，細胞分選酶(Srt)可以通過介導LPxTG結構蛋白的表層黏附途徑，從而對乳酸桿菌的黏附起到重要的作用，同時，通過蛋白組學的高通量蛋白檢測方法，我們發現這一過程也受到胃腸道不同pH的影響，以弱酸性的環境可強化該過程的效應。進一步我們從蛋白組學方法中獲取高表達的LPxTG蛋白，並在體外進行表達純化與功能炎症，結果發現，該類型蛋白可以提高嗜酸乳桿菌的胃腸耐受及腸道模型黏附活性，當將該蛋白套用於腸道細胞炎症模型時，此類型蛋白可以有效的抑制炎症反應的產生，其機理時通過對MAPK途徑中JNK與p38的磷酸化抑制效應來實現的。同時也發現，當此類型Mub蛋白加入時，可以抑制細胞表面受體TLR-4的表達。該研究系統的證明了Srt酶在益生性嗜酸乳桿菌中的黏附介導機制，為篩選高黏附乳酸菌，深入研究分選酶在乳酸菌表層蛋白定位與發揮黏附及益生效應提供了重要的理論依據。
