《納米組織工程技術聯合抑制TGF-β1表達重建尿道的實驗研究》是依託同濟大學，由李超擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：納米組織工程技術聯合抑制TGF-β1表達重建尿道的實驗研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李超
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
構建具有良好結構與功能的支架，為種子細胞提供理想的生長微環境，同時有效抑制尿道瘢痕的形成，是組織工程尿道重建的關鍵。天然的細胞外基質支架，其生物相容性雖較佳，但力學強度不足。我們前期研究發現納米纖維其特有的高比表面積，高孔隙率，高滲透性可最大程度的模仿細胞外基質的天然結構，生物相容性佳，且可調控其強度，易形成產業化。轉化生長因子-β1（TGF-β1）被認為是重要的促瘢痕形成因子。我們前期研究顯示通過抑制TGF-β1表達，可減少膠原合成，促進其降解，防止瘢痕的形成。故本研究擬採用聚己內酯/膠原/絲素蛋白新型納米纖維為支架，以口腔黏膜細胞和成纖維細胞為種子細胞，在此基礎上，以siRNA干擾技術，抑制成纖維細胞TGF-β1表達，使構建的納米組織工程尿道可有效抑制瘢痕的形成。以期探尋尿道重建的新策略，降低尿道狹窄的復發率，為納米組織工程尿道重建技術的進一步研究和臨床套用提供理論基礎和實驗依據。
結題摘要
本研究致力於構建聚己內酯/膠原/絲素蛋白新型納米纖維支架，以口腔黏膜細胞和成纖維細胞為種子細胞，在此基礎上，以siRNA干擾技術，抑制成纖維細胞TGF-β1表達，使構建的納米組織工程尿道可有效抑制瘢痕的形成。課題組成功採用靜電紡絲技術製備出聚己內酯／膠原／絲素蛋白電紡納米纖維支架；將口腔黏膜細胞接種至納米纖維支架表面，採用ＭＴＴ法和掃描電鏡等評價聚己內酯／絲素蛋白／膠原電紡納米纖維的細胞相容性。電鏡結果顯示所製備的電紡纖維直徑均一，呈相互連通的多孔網狀結構，口腔黏膜上皮細胞在改性後的材料表面具有良好的生長形態。從而證實了聚己內酯／絲素蛋白／膠原電紡納米纖維支架，具備合適的孔徑和孔隙率，細胞相容性良好，是一種組織工程尿道重建良好的支架載體。然後我們將siRNA轉染兔成纖維細胞，通過RT-PCR 檢測siRNA對兔TGF-β1TGF-B1表達的干擾效果，並選篩選出有干擾效果的siRNA；把篩選出的有最佳干擾效率的siRNA 重新轉染兔成纖細胞。再以口腔黏膜細胞和轉染後成纖維細胞為種子細胞，以製備的聚己內酯／絲素蛋白／膠原電紡納米纖維作為支架，構建出更接近生理結構的組織工程口腔黏膜，並通過HE染色、掃描電鏡對所構建的組織進行評價，結果顯示口腔黏膜細胞和轉染後的成纖維細胞在支架上生長良好並連線成片，複合效果良好。套用此組織工程材料來進行尿道狹窄的修復重建並設立對照組進行研究對比。研究結果顯示聯合套用口腔黏膜細胞和siRNA轉染的成纖維細胞複合納米支架進行尿道修復重建，尿道管腔通暢，瘢痕生成明顯減少，修復處毛細血管生成明顯增多，修復效果明顯優於單用納米纖維支架修復組。現研究結果，已發表中文核心期刊論著1篇，英文SCI收錄論著2篇，申請獲得實用新型專利1項，申請發明專利2項，已通過初審，公示中。
