《粘球菌M.xanthus滲透脅迫下子實體發育關鍵應答調控子的研究》是依託山東大學，由劉紅擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：粘球菌M.xanthus滲透脅迫下子實體發育關鍵應答調控子的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：劉紅
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
粘細菌以其複雜的多細胞子實體形態發生和孢子分化成為研究原核生物胞間信號傳導與調控的模式材料。子實體發育是一系列基因在胞間信號傳導調控下順序表達的結果，其中最核心的C信號途徑主要由雙組分系統（TCSs）組成，使得TCSs一直成為子實體發育調控研究的熱點。申請人在前一課題的研究中，獲得了一批在淡、海水條件下差異表達的TCSs基因；遺傳學分析顯示，儘管絕大多數檢測的TCSs（15/21）與粘細菌的運動或發育相關，但只有編碼DNA結合應答調控子的Mx1093的缺失導致突變株在淡、海水條件下表現出程度顯著不同的發育缺陷，提示其是滲透脅迫下粘球菌子實體發育關鍵的應答調控蛋白。本申請擬通過鑑定其啟動子和結合蛋白以及其調控的發育基因，闡明其在滲透脅迫應答及子實體發育中的調控機制。相關結果不僅可以補充和豐富已有的C信號途徑，更可以為闡明滲透脅迫乃至其他環境刺激下子實體發育的調控機制奠定基礎。
結題摘要
粘細菌以其複雜的多細胞子實體形態發生和孢子分化成為研究原核生物胞間信號傳導與調控的模式材料,而雙組分系統則是子實體發育調控網路的重要組成。申請人在前一課題的研究中，獲得了一批在淡、海水條件下差異表達的TCSs基因；其中編碼DNA結合應答調控子的Mx1093的缺失導致突變株在淡、海水條件下表現出程度顯著不同的發育缺陷，提示其是滲透脅迫下粘球菌子實體發育關鍵的應答調控蛋白，命名為DidR。本項目首先通過啟動子融合技術鑑定了DidR對幾個已知的重要發育基因的調控，確定了其位於C信號途徑的上游，並通過該途徑調控子實體的發育進程；篩選並鑑定了DidR的一個新的靶基因，其編碼產物作為一個Na+/H+ antiporter在粘球菌鹽脅迫條件下的生長發育中發揮作用；定點突變等研究證實，DidR在磷酸化及非磷酸化狀態下分別調控不同基因的轉錄，且其磷酸化是子實體發育所必須的；RT-PCR顯示，didR與其上游3個基因共轉錄，進一步的研究證實該操縱子負責粘球菌類脂A的合成，通過影響LPS的合成而在子實體的發育生孢中發揮重要作用。上述結果或已投稿或正處於論文整理中。基於上述結果，本項目又開展了比較轉錄組分析，以期獲得更多的發育基因；同時也在通過細菌雙雜交技術大規模篩選鑑定DidR的互作蛋白，以最終闡明其信號傳導途徑。因為前期進展不順，這部分工作還需要更多的時間。本項目培養了1名博士、2名碩士，另有2名碩士在讀。
