《神經元細胞內apoE4(1-272)誘發內質網應激的機制》是依託華中科技大學，由周潔擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：神經元細胞內apoE4(1-272)誘發內質網應激的機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：周潔
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
國內外研究和我們前期結果均顯示神經元內apoE4水解片段apoE4(1-272)才是真正的致AD病變分子，可導致tau蛋白異常磷酸化。近來發現內質網應激(ERS)發生於AD神經元纖維纏結早期。我們前期結果顯示神經元內apoE4(1-272)可誘發ERS。內質網-高爾基體運輸是細胞內蛋白質質量控制系統關鍵環節之一，有賴於微管的穩定性。因此提出神經元內apoE4(1-272)可能通過tau蛋白異常磷酸化而影響小泡運輸、高爾基體募集等重要環節阻滯內質網-高爾基體運輸，進而誘發神經元ERS。擬在前期建立的四環素可調控apoE4(1-272)表達的N2a細胞系中，運用雷射共聚焦、電鏡、螢光漂白等技術，研究神經元內apoE4(1-272)導致tau蛋白異常磷酸化，進而對內質網-高爾基體正向運輸的影響。為深入研究apoE4(1-272)對神經元重要細胞器功能、活動的影響提供依據。
結題摘要
apoE4基因是最常見的AD易感基因，眾多國內外研究均提示神經元內ApoE4蛋白的水解片段ApoE4(1-272)可能是真正的致AD病變分子，但機制仍不清楚。內質網-高爾基體運輸是細胞內蛋白質質量控制系統的關鍵環節之一，有賴於微管的穩定性。近來發現內質網應激(ERS)發生於AD神經元纖維纏結早期。 N2a細胞中無ApoE4基因，因此我們通過建立Dox可調控apoE4(1-272)表達的N2a細胞系—N2aTeton/apoE4(1-272)，證實了ApoE4(1-272)在細胞內的堆積可誘發N2a細胞發生ERS；並檢測到內質網-高爾基體運輸的標記物CPY在內質網及高爾基體中堆積；掃描電鏡觀察到高爾基體破碎現象。這些結果提示ApoE4(1-272)片段可導致N2a細胞發生內質網-高爾基體運輸障礙進而誘發ERS。 進一步的實驗表明：ApoE4(1-272)片段的堆積，導致N2a細胞中總tau含量及tau磷酸化程度顯著增加，採用GSK3抑制劑LiCl可顯著抑制tau磷酸化程度及緩解ERS，而CDK5抑制劑Roscovitine無顯著作用。 綜合上述結果，我們認為：神經元細胞內apoE4(1-272)的堆積，可上調tau蛋白及主要通過激活GSK3β使tau過度磷酸化，從而阻滯內質網-高爾基體運輸，進而誘發ERS。
