《磷脂酶A2及鞘磷脂合成酶雙功能抑制劑研究》是依託復旦大學，由周璐擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：磷脂酶A2及鞘磷脂合成酶雙功能抑制劑研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：周璐
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
本課題針對抗動脈粥樣硬化的兩個重要靶標蛋白磷脂酶A2及鞘磷脂合成酶，設計具有能同時抑制兩個酶活性的新型雙功能抑制劑。我們根據自有的磷脂酶A2及鞘磷脂合成酶抑制劑先導化合物，分析其三維結合模型，對其進行合理拼接，設計得到同時具有兩個靶標酶的活性片段的化合物，並進行計算機模擬對接分析來最佳化設計結果。在此基礎上通過有機合成得到所設計的一系列目標化合物，並對其分別進行兩個靶標酶的體外生物活性測試，磷脂酶A2的活性測試採用以ANS為螢光探針的螢光顯色法，鞘磷脂合成酶的活性測試採用高效液相色譜分析法。通過對合成目標化合物的體外抑制活性測試和構效關係研究，採用混合體系活性測定方法，進一步驗證雙功能抑制劑相對於單靶點抑制劑的優勢。
結題摘要
動脈粥樣硬化是一種脂質代謝異常所引起的慢性炎症疾病，其發病機制涉及了多個方面。雖然作用於單個重要靶點包括調血脂藥、抗氧化藥可以達到確切的療效，但由於該病症涉及的發病因素很多，所以，多靶點藥物的設計方法更適用於這類複雜疾病的藥物研究。本課題針對動脈粥樣硬化發病機制中重要的脂質代謝和炎症反應過程中的關鍵酶——鞘磷脂合酶（SMS）和分泌型磷脂酶A2（sPLA2），對已有的SMS和sPLA2抑制劑進行構效分析，結合多靶點藥物的設計思路，將兩部分藥效團合理拼接，設計併合成了一系列雙功能抑制劑，並分別對其進行體外生物活性評價。體外酶抑制活性結果顯示部分化合物具有中等的sPLA2和SMS抑制活性（IC50: 20 µM）。這一結果驗證了該雙功能抑制劑設計思路的合理性，同時對進一步的結構最佳化也具有一定的指導意義。在課題研究過程中，我們建立並最佳化了以HPLC為檢測分離手段的鞘磷脂合酶體外活性評價體系，該方法靈敏度高，操作簡單，為鞘磷脂合酶抑制劑的篩選提供了快速簡便的方法。
