《睪丸特異性新基因T279敲除小鼠的表型分析》是依託北京大學，由蔡志明擔任負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：睪丸特異性新基因T279敲除小鼠的表型分析
- 項目負責人：蔡志明
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
男性不育症的病因是一個研究熱點。本課題組在前期工作中篩選出一個新的睪丸特異性表達基因(T279)，T279在人類和小鼠睪丸的表達水平與年齡呈正相關，在無精子症和隱睪症患者睪丸中無表達，雄性T279基因敲除雜合小鼠出現不育、睪丸體積明顯變小，以及附睪無精子等表型，嵌合鼠雜合子與C57BL/6J小鼠回交已產生第5代T279 +/-小鼠。本項目擬進行如下研究:1、採用交配實驗和附睪精子測定分析第6代純種C57BL/6J T279-/-生育能力。2、採用生精細胞凋亡與增殖檢測等技術，分析敲除小鼠的睪丸形態結構和細胞學變化。3、採用RT-PCR和免疫組化等技術，確定T279基因在敲除小鼠及其野生型小鼠睪丸中的表達特徵。.本研究預期結果有助於進一步揭示小鼠精子發生中的分子機理，也將為男性不育症的病因及臨床診治提供新的科學依據。
結題摘要
T279 是本實驗室篩選出的一個睪丸特異性表達新基因，主要定位於睪丸精子細胞和精子頂體。為了進一步探討該基因在雄性生殖過程中的作用，我們建立了T279 基因敲除小鼠模型。初步分析結果顯示，T279 基因敲除對雄性小鼠的生殖能力沒有明顯影響；與野生型小鼠比較，T279 基因敲除雄性小鼠的體重、睪丸大小和形態、精子數量和運動能力無顯著差異。 同時，我們採用RT-PCR和免疫組織化學的方法，檢測了精子頂體相關蛋白ACRV1基因在小鼠和人睪丸組織的表達特徵。結果顯示，ACRV1基因在出生後31天的小鼠睪丸組織中開始表達，主要表達在圓形精子細胞和長形精子細胞；ACRV1基因僅在成人睪丸組織中表達，在6月胎兒睪丸組織中無表達，且特異性表達在精子細胞。相關論文分別發表於2011年7月的《中國男科雜誌》雜誌和2011年9月的《生殖與避孕》雜誌。 本研究還採用RT-PCR和Western blot等方法檢測不同年齡男性精子CFTR (Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator)的表達水平。結果顯示，隨著年齡增加，精子CFTR的表達水平下降、精子運動力和精子獲能的能力降低。相關論文於2013年10月發表在《Reproduction》雜誌。
