《睪丸局部感染時的鋅指蛋白265與大鼠Sertoli細胞》是依託上海交通大學，由李偉毅擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：睪丸局部感染時的鋅指蛋白265與大鼠Sertoli細胞
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李偉毅
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
鋅指蛋白－ZNF265是一個參與細胞分化、發育、基因表達調控的多功能蛋白，在人類、小鼠中ZNF265廣泛穩定表達。我們前期工作表明，ZNF265在大鼠Sertoli細胞（支持細胞）呈特異性表達，且表達量與感染密切相關。同時研究發現：大鼠Sertoli細胞在睪丸局部感染時，能通過改變其IL-1、IL-6、TGF-β和FasL的分泌或表達格局，在局部抗感染免疫中發揮重要的免疫調節作用，並參與、維持大鼠睪丸的免疫豁免。本項目研究：大鼠睪丸局部感染時，ZNF265表達格局與大鼠Sertoli細胞免疫功能的關係，對Sertoli細胞IL-1、IL-6、TGF-β、MCP-1、FasL及TLR分泌或表達格局的影響、調節，以揭示睪丸局部感染時鋅指蛋白－ZNF265對大鼠Sertoli細胞免疫作用及相應基因表達的調節，為尋找免疫調節，免疫干預的新靶點提供可靠的實驗基礎。
結題摘要
Sertoli細胞(支持細胞)是睪丸主要的基質細胞，參與血-睪屏障的組成，維持調控睪丸局部的免疫豁免[1,2]。鋅指蛋白265(Zinc finger protein 265, ZNF265)是含兩個鋅指結構及具有絲氨酸/精氨酸富集區的鋅指蛋白[3]，目前研究主要認為它具有RNA結合功能，和轉錄、前體mRNA剪下相關[4,5]。我們在前期的研究中發現，ZNF265在大鼠Sertoli細胞中特異性高表達，且表達量和感染密切相關[6]；而Sertoli細胞可以通過改變IL-1、IL-6及TGF-β等的表達，發揮免疫調節作用，增強睪丸局部抗感染的免疫應答[7,8]。 本論文通過慢病毒介導的RNAi技術，沉默Sertoli細胞中ZNF265的表達，觀察Sertoli細胞在溶脲脲原體(Ureaplasma Urealyticum，UU) 感染後，對IL-1α、IL-6、MCP-1、Toll樣受體（TLR2、TLR6）、TGF-β、FasL表達變化及對NF-κB信號通路激活的影響；另外通過染色質免疫共沉澱（ChIP）技術進一步從蛋白質-DNA作用的角度探討ZNF265在Sertoli細胞中抗感染和免疫調節作用及可能的作用機制。 研究結果發現：慢病毒介導的RNAi技術有效的干擾了ZNF265在大鼠Sertoli細胞中的表達。在RNAi後，UU感染的早期，IL-1α、IL-6、MCP-1、TLR2和TLR6表達升高，NF-κB激活增加，TGF-β及FasL表達也升高；而在感染後期，IL-1α、IL-6、MCP-1、TLR2和TLR6表達下調，NF-κB激活減弱，TGF-β及FasL表達仍持續升高且達最高水平。另外通過ChIP分析發現，ZNF265蛋白與TGF-β及FasL的啟動子區域結合，並且TGF-β及FasL在RNAi組的表達水平，較無RNAi組明顯升高。 上述結果表明：ZNF265在Sertoli細胞中發揮了重要的抗感染功能，可能通過和TGF-β及FasL相互作用，在Sertoli細胞免疫調節中共同發揮重要作用。
