盆腔漿液性癌中核因子Nrf2的作用及機制研究

《盆腔漿液性癌中核因子Nrf2的作用及機制研究》是依託浙江大學，由陳寧擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：盆腔漿液性癌中核因子Nrf2的作用及機制研究
• 依託單位：浙江大學
• 項目負責人：陳寧
• 項目類別：青年科學基金項目

項目摘要

盆腔漿液性癌包括卵巢、腹膜、輸卵管來源的漿液性癌。盆腔漿液性癌是女性生殖系統死亡率最高的惡性腫瘤，嚴重威脅女性健康。目前盆腔漿液性癌發病機理及化療耐藥相關研究成為提高對疾病認識及發展臨床診斷治療策略的關鍵之一。研究表明核因子Nrf2參與了多種人體腫瘤的發生髮展過程，且與腫瘤耐藥的形成關係密切。 Nrf2-ARE通路與p53通路的串話影響了腫瘤的進程與細胞凋亡。本研究擬通過多種分子生物學手段，檢測盆腔漿液性癌中Nrf2及其相關基因的表達水平和基因突變、甲基化、LOH發生率，為不同級別盆腔漿液性癌的發病機制提供新的理論依據，並闡明盆腔漿液性癌中Nrf2-ARE通路與p53信號通路間的串話機制。同時通過體內外實驗評估鴉膽子苦醇作為化療增敏劑在盆腔漿液性癌治療中的作用，為新的盆腔漿液性癌靶向藥物的開發提供臨床前實驗室證據。

結題摘要

本項目擬對高、低級別盆腔漿液性癌中Nrf2及相關基因的表達研究及其機制探索，對盆腔漿液性癌中Nrf2表達異常在疾病發病進展中的機制進行研究。實驗首先對高低級別漿液性癌中Nrf2免疫組織化學染色結果進行量化分析，分析結果認為高低級別漿液性癌中，Nrf2的表達沒有顯著統計學差異。後續對低級別漿液性癌病例標本的染色結果重新進行了定量分析和生存率及復發時間回訪調查。結果分析發現，在IIIC期病例中，Nrf2評分小於等於2分者，其無病生存期明顯長於Nrf2大於等於3分者，差異有統計學意義（P＜0.05）。這一結果提示，在IIIc期盆腔漿液性癌病人中，Nrf2染色陽性這一因素與病人的無病生存期的長短顯著相關。後續我們對漿液性癌中Nrf2表達量與化療耐藥相關性進行了檢測。實驗說明，Nrf2表達量高低與盆腔漿液性癌對化療藥物尤其是鉑類藥物的耐藥性密切相關，但Nrf2的表達增高對細胞的耐紫杉醇作用影響不大。之後我們擬對Nrf2影響順鉑耐藥性機制進行研究。但轉染部分實驗顯示，LVpGCSIL-004PSC42274-1病毒轉染SKOV3細胞後，轉染組Nrf2蛋白的表達與對照組未見明顯差異。因此未執行後續的鉑類耐藥機制相關蛋白的檢測。後續我們對卵巢癌化療耐藥相關基因進行了梳理。選擇高爾基複合體蛋白COPB2基因作為新的卵巢癌化療機制的研究對象。實時定量PCR顯示，COPB2在三株卵巢癌細胞系中表達異常升高，提示COPB2是卵巢癌的原癌基因，這是首次在卵巢癌中對COPB2進行表達及功能學相關研究。細胞增殖和克隆形成實驗表明，COPB2的表達下調可以顯著抑制卵巢癌細胞的增殖，細胞集落形成能力明顯削弱。實驗結果認為COPB2表達異常參與了卵巢癌疾病的發病和進展。在婦科良性疾病中我們進行了Nrf2的檢測和機制研究。子宮腺肌病內膜組織中Nrf2表達量顯著高於正常組織，通過分子生物學手段調控Nrf2表達，可以觀察到MMP9蛋白隨之發生平行的表達改變，劃痕實驗證實細胞遷移能力隨之上升或下降。實驗認為，Nrf2的表達異常在子宮腺肌病中促進了內膜腺體細胞的侵襲和向肌層的遷移。本研究後續首次發現了高爾基體蛋白亞基COPB2基因在卵巢癌中的異常表達及其在癌細胞增殖方面的促進作用，同時對Nrf2在子宮腺肌病和女性壓力性尿失禁中進行了深入的機制研究，形成並擴充了本團隊的Nrf2與婦科疾病相關機制研究體系。