白血病分子診斷是指通過分子生物學技術檢測樣品中的生物大分子從而診斷白血病。白血病的發生與特異性染色體異常和基因改變有關，白血病分子診斷也已廣泛地套用於臨床，並為疾病發現、治療、預後、發現微小殘留病變提供參考。
基本介紹
- 中文名：白血病分子診斷
- 參考值：陰性則不存在此基因突變
- 臨床意義：可從病因上進行診斷並進行分型
檢測方法,操作步驟,正常參考值,臨床意義,
檢測方法
1.融合基因及重排的檢測
（1）BCR-ABL融合基因 此基因見於95%的慢性粒細胞白血病（CML）、25%～40%的成人急性淋巴細胞白血病（ALL）和4%～6%的兒童ALL。費城染色體（Ph染色體）即為此融合基因的一種，是CML的重要標誌，ALL患者如出現Ph陽性則提示預後較差。BCR-ABL融合基因常用螢光原位雜交（FISH）和螢光定量聚合酶鏈式反應（FQPCR）進行檢測。
（2）PML-RARα融合基因 此基因見於急性早幼粒細胞白血病（APL），常用的檢測方法為FISH、FQPCR、實時PCR（RT-PCR）。
（3）Ig/TCR基因重排 IgH、TCRδ、TCRγ、TCRβ是ALL常見的基因重排，急性B淋巴細胞白血病（B-ALL）患者發生率依次為95%、94%、55%、33%，急性T淋巴細胞白血病（T-ALL）患者發生率依次為14%、68%、91%、89%。不同患者基因重排序列不同，可作為分子標誌用於分型診斷。主要的檢測方法有PCR。
2.基因突變及異常表達的檢測
（1）C-KIT基因突變 此基因突變常出現於核心結合因子相關的急性髓性白血病（AML）（CBF-AML）中，是其預後的重要指標，也是藥物治療的重要靶點。可用多種方法進行檢測，DNA測序為最直接和最準確的方法。
（2）NPM基因突變 此基因突變見於AML的多種亞型，可作為無染色體易位的AML標誌。常用PCR、基因測序等方法進行檢測。
（3）NOTCH1基因突變 此基因突變存在於50%的T-ALL患者中，也是T-ALL最常見的活化癌基因，有次基因突變的成人T-ALL患者預後較差。常用PCR和直接測序法進行檢測。
（4）FLT3基因突變 此基因突變是AML中最普遍的突變靶基因，60歲以下患者中有此基因突變則預後較差。此基因突變也是治療的靶點。可用毛細管電泳（CE）、PCR、高解析度溶解曲線（HRM）、直接測序、變性聚丙烯醯胺凝膠電泳（PAGE）等方法進行檢測。
（5）N-RAS基因突變 此基因突變存在於11%～30%的AML患者中，在骨髓異常綜合徵（MDS）患者中出現率為20%～30%，而MDS發展為急性白血病後此基因突變率高達50%～60%。常用PCR和螢光原位雜交等進行檢測。
（6）HOX11基因表達異常 此表達異常見於7%的T-ALL患者，有此表達異常的患者化療效果好，預後亦較其他T-ALL患者好。可通過螢光定量PCR檢測表達產物水平。
（7）WT1基因表達異常 多數白血病患者均有此表達異常，其表達及表達水平是急性白血病獨立的預後因子，也是不伴有特異性分子異常的AML微小殘留白血病（MRD）的理想檢測指標。
（1）BCR-ABL融合基因 此基因見於95%的慢性粒細胞白血病（CML）、25%～40%的成人急性淋巴細胞白血病（ALL）和4%～6%的兒童ALL。費城染色體（Ph染色體）即為此融合基因的一種，是CML的重要標誌，ALL患者如出現Ph陽性則提示預後較差。BCR-ABL融合基因常用螢光原位雜交（FISH）和螢光定量聚合酶鏈式反應（FQPCR）進行檢測。
（2）PML-RARα融合基因 此基因見於急性早幼粒細胞白血病（APL），常用的檢測方法為FISH、FQPCR、實時PCR（RT-PCR）。
（3）Ig/TCR基因重排 IgH、TCRδ、TCRγ、TCRβ是ALL常見的基因重排，急性B淋巴細胞白血病（B-ALL）患者發生率依次為95%、94%、55%、33%，急性T淋巴細胞白血病（T-ALL）患者發生率依次為14%、68%、91%、89%。不同患者基因重排序列不同，可作為分子標誌用於分型診斷。主要的檢測方法有PCR。
2.基因突變及異常表達的檢測
（1）C-KIT基因突變 此基因突變常出現於核心結合因子相關的急性髓性白血病（AML）（CBF-AML）中，是其預後的重要指標，也是藥物治療的重要靶點。可用多種方法進行檢測，DNA測序為最直接和最準確的方法。
（2）NPM基因突變 此基因突變見於AML的多種亞型，可作為無染色體易位的AML標誌。常用PCR、基因測序等方法進行檢測。
（3）NOTCH1基因突變 此基因突變存在於50%的T-ALL患者中，也是T-ALL最常見的活化癌基因，有次基因突變的成人T-ALL患者預後較差。常用PCR和直接測序法進行檢測。
（4）FLT3基因突變 此基因突變是AML中最普遍的突變靶基因，60歲以下患者中有此基因突變則預後較差。此基因突變也是治療的靶點。可用毛細管電泳（CE）、PCR、高解析度溶解曲線（HRM）、直接測序、變性聚丙烯醯胺凝膠電泳（PAGE）等方法進行檢測。
（5）N-RAS基因突變 此基因突變存在於11%～30%的AML患者中，在骨髓異常綜合徵（MDS）患者中出現率為20%～30%，而MDS發展為急性白血病後此基因突變率高達50%～60%。常用PCR和螢光原位雜交等進行檢測。
（6）HOX11基因表達異常 此表達異常見於7%的T-ALL患者，有此表達異常的患者化療效果好，預後亦較其他T-ALL患者好。可通過螢光定量PCR檢測表達產物水平。
（7）WT1基因表達異常 多數白血病患者均有此表達異常，其表達及表達水平是急性白血病獨立的預後因子，也是不伴有特異性分子異常的AML微小殘留白血病（MRD）的理想檢測指標。
操作步驟
常見的分子診斷主要步驟包括核酸提取、目的基因序列擴增、產物檢測（凝膠電泳等）。針對不同的突變基因，其引物及探針序列亦不相同。
正常參考值
如檢測結果為陰性，則不存在此基因突變。
臨床意義
大部分白血病都存在染色體易位，染色體易位是其診斷的重要指標。白血病分子診斷已廣泛套用於白血病的臨床診斷中，不僅具有特異性強、快速的優勢，更可從病因上進行明確診斷，並進行分型，同時通過檢測相關突變位點或表達產物可為治療、預後及治療效果提供參考。
