《白藤梨多糖佐劑作用新的細胞和分子機制研究》是依託浙江大學，由孫紅祥擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：白藤梨多糖佐劑作用新的細胞和分子機制研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：孫紅祥
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
白藤梨多糖(AEPS)系從白藤梨中分離到的具有佐劑活性的水溶性多糖。本項目針對多糖佐劑作用機制不明的現狀，研究AEPS誘導免疫應答的新的細胞和分子機制。通過檢測腹腔滲出液和血清中細胞因子和趨化因子含量，鑑定募集到腹腔中免疫細胞的類型、腹腔和淋巴結中攝取抗原和佐劑、加工處理抗原的細胞群，定量分析不同時間不同類型細胞抗原的攝入量和處理量，觀察細胞攝取抗原和佐劑的形式、分析腹腔和淋巴結中抗原提呈細胞的表面分子表達水平及刺激T細胞的能力，候選靶細胞的去除對AEPS佐劑活性的影響，確定AEPS佐劑作用的靶細胞。以炎性小體PCR晶片檢測靶細胞中參與炎性小體形成、NLR受體及其信號介導的相關基因表達譜的影響，篩選出顯著差異表達的基因，進行生物信息學分析，構建基因調控網路，確定AEPS佐劑作用的信號轉導通路及作用的靶分子。為合理設計新型、安全、有效的佐劑和高通量篩選佐劑活性天然產物奠定基礎。
結題摘要
白藤梨多糖(AEPS)系從白藤梨中分離到的具有佐劑活性的水溶性多糖。本項目通過檢測AEPS腹腔注射後局部組織細胞因子和趨化因子含量，流式細胞術鑑定募集到腹腔中免疫細胞的類型、腹腔和淋巴結中攝取抗原和加工處理抗原的細胞群，分析淋巴結中抗原提呈細胞的表面分子表達水平，確定AEPS作用的候選靶細胞。採用小鼠表達譜晶片檢測了AEPS對小鼠RAW264.7巨噬細胞和AEPS腹腔注射對局部組織基因表達譜的影響，篩選出差異表達的mRNA和長鏈非編碼RNA (lncRNA)，採用IPA (Ingenuity Pathway Analysis)軟體分析差異表達mRNA的核心通路、功能、上游調節因子、調節效應以及生物學網路。通過lncRNA與mRNA關聯分析預測了差異表達lncRNA的靶基因和轉錄因子，構建“lncRNA–轉錄因子–靶基因”三元組關係網路圖。在此基礎上，對新發現的一個正向免疫調節linRNA——lincRNA-AR1開展了系統的鑑定和功能分析研究，闡明lincRNA-AR1的序列結構信息、特性及生物學功能。本項目研究結果為今後研究免疫活性多糖分子新靶點及高通量篩選免疫活性多糖奠定良好的基礎和技術支撐。
