《白細胞介素3,6融合基因在小鼠體內的持續高效表達》是依託浙江大學,由瞿國偉擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名:白細胞介素3,6融合基因在小鼠體內的持續高效表達
- 依託單位:浙江大學
- 項目負責人:瞿國偉
- 項目類別:面上項目
- 批准號:39570325
- 申請代碼:H0803
- 負責人職稱:助理研究員
- 研究期限:1996-01-01 至 1998-12-31
- 支持經費:8(萬元)
項目摘要
從人外周血分離獲得單個核細胞,與脂多糖共孵育48小時,提取總mRNA,經逆轉錄反應及巢式PCR,獲得IL-6cDNA雙鏈。將該片段與質粒經限制性內切酶酶切後連線,構成重組質粒。經限制性內切酶酶切片段及雙脫氧鏈終止法進行序列分析,確證所得確係目的重組質料。實驗小鼠體內生物學活性檢測。對實驗小鼠分組分別注射CTX,CTX+rhIL-6,發現IL-6+CTX組與CTX組造血面積間有極顯著性差異(P<0.001),並且前者外周血白細胞減少的幅度小。表明rhIL-6對受化療損傷的造血組織確有保護作用。對於IL-3的克隆,經多次重複實驗,均未獲得IL-3cDNA,可能是由於人外周血單個核細胞經利激後轉錄的mRNA量過少或產生後被迅速降解。由於IL-3重組質粒構建失敗無法按原計畫進行IL-3和IL-6基因的融合等實驗。