《白介素6上調腎臟ENaC參與高血壓發生》是依託武漢大學，由李柯擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：白介素6上調腎臟ENaC參與高血壓發生
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：李柯
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腎臟遠曲小管和集合管的上皮細胞鈉通道（ENaC）是腎臟調節水鈉代謝的限速步驟，許多激素、細胞因子和化學物質可以上調ENaC的表達和活性，影響血容量，並參與血壓調節。.已有研究證實炎症因子白介素6（IL-6）與高血壓密切相關。我們前期實驗發現IL-6可以上調ENaC在皮質集合管上皮細胞中的表達。由此本課題將深入研究IL-6上調ENaC在腎遠曲小管上皮細胞膜上表達的作用及其機制，為其參與高血壓發生提供理論和實驗依據。.本研究運用PCR和蛋白印跡探討參與IL-6上調ENaC的表達、轉位和降解的信號通路；運用膜片鉗技術驗證IL-6對ENaC電流調控作用；採用IL-6基因敲除鼠觀察高鹽飲食下ENaC的表達及其在血壓調控中的作用。旨在為防治高血壓提供新靶點。
結題摘要
上皮細胞鈉離子通道（Epithelial Sodium Channel，ENaC）表達在腎臟遠曲小管和集合管腔面，特異性的允許鈉離子由細胞外進入細胞內，從而調節體內的水鈉代謝。由於遠曲小管ENaC受到多種激素、細胞因子和化學物質的調節，因此遠曲小管段鈉離子的重吸收被認為是維持體內總Na+平衡、血容量穩定和血壓水平的重要組成部分。ENaC蛋白結構的異常被發現是Liddle綜合徵鹽敏感性高血壓的病因。因此ENaC在原發性高血壓中的作用越來越受到學者的重視。 目前認為ENaC如異常活化，可能通過增加血容量、細胞內鈉離子濃度和血管平滑肌收縮性等途徑升高外周血管阻力，升高血壓。尋找能上調ENaC活性的信號分子並揭示其機制，將為闡明高血壓的始發機制提供理論依據。現有研究表明IL6可能參與了高血壓的發生髮展。文獻檢索顯示血壓升高與IL6的濃度顯著正相關。在預實驗中，發現用IL6處理腎臟遠曲小管和皮質集合管上皮細胞，可以上調ENaC在基因、蛋白水平。同時ENaC通道的電流也增加。本課題擬在此基礎上，繼續探討IL6如何上調ENaC表達水平。文獻檢索顯示Jak2/STAT3、Ras/MAPK、PI3 k/Akt、.NF-κB信號通路和Nedd4-2介導的泛素化可能參與這一過程。 結果如下：不同濃度IL6作用於腎臟M-1細胞12小時後，抑制αENaC的表達，但隨著IL6濃度的增加抑制作用減弱；對βENaC的影響不大；對γENaC的影響表現在當IL6濃度為100ng/ml 時增加γENaC的表達。IL6對細胞膜上ENaC各亞單位的表達影響不大。分別抑制JAK2/STAT3和NF-κB信號通路不能抑制IL6導致γENaC的表達增加；分別抑制PI3K和p38 MAPK信號通路抑制了IL6導致的γENaC的表達增加。鈉離子螢光指示劑實驗顯示各組細胞上ENaC通道的活性沒有顯著性差異。單純高鹽飲食不能升高白介素6基因敲除小鼠和對照小鼠的血壓；切除單側腎臟後給予DOCA能升高白介素6基因敲除小鼠和對照小鼠的血壓，但兩組之間沒有顯著性差異。各組小鼠尿鈉含量沒有顯著性差異。 本研究通過細胞和動物模型實驗顯示IL6可能通過PI3K和p38 MAPK信號通路上調M-1細胞上γENaC表達，但對ENaC通道的活性影響不大。本實驗中IL6上調ENaC的表達在高血壓的發生髮展中可能起輔助作用。
