番茄miR167多基因座的表達特徵及其啟動子調控分析

《番茄miR167多基因座的表達特徵及其啟動子調控分析》是依託重慶大學，由李正國擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：番茄miR167多基因座的表達特徵及其啟動子調控分析
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：李正國
• 依託單位：重慶大學

中文摘要

番茄miR167對植物的生長素信號轉導具有重要調節作用。我們研究發現miR167在基因組中存在3個基因座，受控於不同的啟動子，能產生3個不同的miR167前體，表明這3個基因座可能存在明顯的表達時空特異性，並可能對成熟miR167的豐度具有重要影響。本項目擬通過定量PCR技術分析miR167的3個轉錄本、成熟miR167以及目標基因（sl-ARF6a、sl-ARF8a和sl-ARF8b）在不同組織、花的不同部位、不同果實發育階段的表達模式；同時，通過轉基因技術研究3個基因座啟動子的調控方式。從而闡明miR167多基因座的表達特徵，以及與成熟miR167豐度和目標基因表達的關係，初步闡明miR167多基因座對miR167表達的調控作用。研究結果對闡明miRNA多基因座的表達調控機制及通過基因工程手段調控microRNA表達具有重要參考價值。

結題摘要

miRNA對植物的生長發育過程發揮著重要的調節作用。本項目從番茄中分離了miR167三個基因座的啟動子，對啟動子調控特性進行了分析；通過5’-RACE技術對其目標基因的剪下進行了鑑定；構建了miR167a、miR167b和miR167c植物轉化載體，並獲得3個啟動子的番茄轉基因株系；分析了啟動子在番茄幼苗、花期、果實及不同激素處理後的表達模式。同時，對其目標基因Sly-ARF8a和Sly-ARF8b在番茄中的表達模式及生長素、乙烯處理的表達特徵，以及與miR167的調控關係進行了分析。結果表明，番茄中miR167a、b的表達強於miR167c；miR167a受生長素、赤黴素和乙烯誘導表達；miR167b受生長素和赤黴素誘導表達；miR167c受赤黴素和乙烯誘導表達，說明激素對miR167的三個啟動子具有不同調控機制。分析發現miR167b對Sly-ARF8a的調控作用強於Sly-ARF8b；miR167a和c對Sly-ARF8b的調控作用強於Sly-ARF8a，說明miR167三個基因座對目標基因的調控具有一定的特異性。本研究初步明確了Sly-miR167三個啟動子的調控特徵，為深入闡明Sly-miR167對番茄生長發育的調控作用奠定了很好的基礎。