甲基綠—派洛寧

甲基綠、派洛寧為兩種鹼性染料。甲基綠分子有兩個正電荷，易與雙鏈DNA結合，使DNA顯示綠色，派洛寧分子有一個正電荷，易與RNA結合，使RNA顯示紅色。

基本介紹

• 中文名：甲基綠—派洛寧
• 外文名：methyl green-pyronin
• 別名：unna試劑
• 性質：鹼性染料

別名

甲基綠—派洛寧又叫unna試劑。

甲基綠與吡羅紅混合使用時，即稱為 甲基綠-派洛寧（又名：甲基綠-吡羅紅）。

配製

取A液20 mL和B液80 mL混合配成染色劑。注意：該試劑應現配現用。

A液：配製方法一：取吡羅紅甲基綠粉1 g，加入到100 mL蒸餾水中溶解，過濾後將濾液放入棕色瓶中備用。 配製方法二：取甲基綠2 g溶於98 mL蒸餾水中，取吡羅紅G 5 g溶於95 mL蒸餾水中。取6 mL甲基綠溶液和2 mL吡羅紅溶液加入到16 mL蒸餾水中，即為A液，放入棕色瓶中備用。

B液：取乙酸鈉16.4 g，用蒸餾水溶解至1 000 mL；再取乙酸12 mL，用蒸餾水稀釋至1 000 mL。取配好的乙酸鈉溶液30 mL和稀釋的乙酸20 mL，加蒸餾水50 mL，配成pH為4.8的溶液。

特異染色原理

甲基綠—派洛寧（methyl green-pyronin）為鹼性染料，它分別能與細胞內的DNA、RNA結合呈現不同顏色。當甲基綠與派洛寧作為混合染料時，甲基綠與染色質中DNA選擇性結合顯示綠色或藍色；派洛寧與核仁、細胞質中的RNA選擇性結合顯示紅色。其原因可能是兩種染料的混合染液中有競爭作用，同時兩種核酸分子都是多聚體，而其聚合程度有所不同。甲基綠易與聚合程度高的DNA結合呈現綠色。而派洛寧則與聚合程度較低的RNA結合呈現紅色（但解聚的DNA也能和派洛寧結合呈現紅色）。即RNA對派洛寧親和力大，被染成紅色，而DNA對甲基綠親和力大，被染成綠色。