《用改良T-DNA標籤法克隆番茄抗枯萎病基因I-3的研究》是依託華南農業大學，由汪國平擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：用改良T-DNA標籤法克隆番茄抗枯萎病基因I-3的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：汪國平
- 依託單位：華南農業大學
- 批准號：30771472
- 申請代碼：C1506
- 負責人職稱：教授
- 研究期限：2008-01-01 至 2010-12-31
- 支持經費：30（萬元）
項目摘要
番茄枯萎病菌小種3是番茄生產的巨大潛在危害，在精細定位專化性抗病基因I-3及克隆到其相應病原菌無毒基因AvrSIX1的前期工作基礎上，本研究擬用改良T-DNA標籤法克隆I-3基因。將AvrSIX1和綠色螢光蛋白基因GFP連線到T-DNA中，構建表達載體並用髮根農桿菌介導轉化抗、感番茄雜種F1，利用基因對基因特異互作原理篩選得到因抗病基因被插入破壞而能存活的突變體，利用Tail-PCR得到T-DNA的旁鄰序列；根據功能預測、次級漸滲系快速定位及RT-PCR檢測抗、感材料差異表達的結果，確定候選抗病基因片段；在經RNA干涉方法進行功能驗證後用快速擴增cDNA末端方法得到全長基因；通過與已克隆的I-2基因序列比較，分析出現專化性抗性的分子機理。研究結果將為育種實踐提供指導，並豐富維管束病害抗性分子機理理論；同時，發展的改良T-DNA標籤法也為克隆其他抗病基因提供參考。
