《瓜類果斑病菌vgrG基因在T6SS介導毒力作用中的功能研究》是田艷麗為項目負責人，南京農業大學為依託單位的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：瓜類果斑病菌vgrG基因在T6SS介導毒力作用中的功能研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：田艷麗
- 依託單位：南京農業大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
vgrG基因是編碼VI型分泌系統（T6SS）的重要組分，也是T6SS介導毒力作用的關鍵因子。儘管人們對vgrG基因對人和動物病原細菌的毒力作用已有較深入的了解，但對其在植物病原細菌致病過程中的功能還知之甚少。申請人最近研究證明瓜類果斑病菌（簡稱Ac）T6SS介導病原菌毒力作用，並在Ac T6SS基因簇外，初步鑑定了12個vgrG同源基因。本項目擬以Ac vgrG基因為對象，為揭示其在T6SS介導毒力作用中的功能，通過構建缺失突變體，利用Western blot分析和致病性測定，從12個Ac vgrG基因中鑑定T6SS毒力關鍵的vgrG基因，此外，擬通過酵母雙雜交以及pull down等技術手段，解析VgrG蛋白與T6SS其他核心組分間的互作關係，勾畫Ac T6SS核心蛋白互作網路圖。Ac vgrG基因在T6SS介導毒力作用中的功能研究，對揭示瓜類果斑病菌致病性機理具有重要的科學意義。
結題摘要
Ⅵ型分泌系統（T6SS）是最近發現的一種新型的分泌系統。研究發現，病原菌利用T6SS形成的類似於T4噬菌體尾部的管道結構將效應蛋白直接轉運到宿主細胞。在構成T6SS的核心組分中，VgrG蛋白形成三聚體穿刺結構，並與其臨位的PAAR蛋白形成複合體，是介導T6SS抗菌活性和毒力作用的關鍵因子。本研究通過與已報導病原菌的T6SS核心基因序列進行比對分析，發現在瓜類果斑病菌AAC00-1菌株的T6SS基因簇外存在12個vgrG同源基因和7個PAAR同源基因，並分別構建了缺失突變體。通過測定突變體對甜瓜幼苗的致病力、種子－幼苗的傳播和定殖能力以及生物膜的形成，確定了有3個vgrG同源基因（Δ0240，Δ0481和Δ0497）和4個PAAR同源基因（Δ0241，Δ0483，Δ0499和Δ3751）在T6SS介導病原菌毒力作用中發揮重要作用。通過Real-time PCR 和Western Blot技術證明上述7個基因對於T6SS核心組分Hcp的分泌是必需的。綜上所述，本研究為探討T6SS介導瓜類果斑病菌毒力作用奠定了基礎。同時對於揭示T6SS核心組分間的關係提供了重要的線索。項目資助發表SCI論文4篇，培養研究生1名。項目獲助直接經費18.00萬元，實際支出18.00萬元。
