犬源流感病毒致病機制及其分子演化的研究

《犬源流感病毒致病機制及其分子演化的研究》是依託華南農業大學，由李守軍擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：犬源流感病毒致病機制及其分子演化的研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：李守軍
• 依託單位：華南農業大學

項目摘要

本課題擬以近年來分離自我國華南地區犬源流感病毒為研究對象，利用本實驗室良好的工作條件（BSL3）和先進的儀器設備，對影響我國的犬源流感的病原學、流行病學、病毒傳播及致病分子機制等方面開展研究，通過血清學、病原學、分子流行病學、生物信息學等方法和手段，分析我國犬源流感的分子進化規律，摸清我國犬源流感的流行規律，通過各代表性毒株對不同種屬動物（犬、小鼠、家禽等）間的感染及致病性試驗，分析我國犬源流感在不同種屬動物間的感染、傳播及致病的能力及差異，揭示犬源流感在人、哺乳動物及家禽之間的傳播機制。同時利用反向遺傳操作技術，在分子水平上研究犬源流感病毒在不同種屬間的傳播及致病的分子機制，為犬源流感及人流感的預防和控制、犬源流感的流行預警、新型基因工程修飾或致弱流感疫苗的研製及新型抗流感藥物的研製提供全面、準確、直接的理論依據和科學研究基礎。

結題摘要

本課題以近年來分離自我國華南地區犬源流感病毒為研究對象，利用本實驗室良好的工作條件和先進的儀器設備，對影響我省乃至我國的犬源流感的病原、流行病學、傳播及致病分子機制等開展研究，通過血清學、病原學、分子流行病學、生物信息學等方法和手段，分離出7株CIV，建立了犬源流感病毒庫，並初步掌握了廣州市犬流感病毒血清學和病原學流行規律。利用生物信息學，分析了不同毒株關鍵位點的差異，7株CIV與亞洲犬源和禽源H3N2亞型流感病毒的基因屬於一個分支，且與亞洲分離到的CIV親源關係最近；與人源和豬源的H3N2亞型流感病毒的基因在進化上屬於不同的分支，親緣關係相對較遠；與美國的犬源和馬源流感病毒的基因也屬於不同的分支，親緣關係最遠。利用特異性引物擴增CGZ3株的PB1、PB2、PA、HA、NA、NP、△M、NS基因，其中在M基因進行沉默突變，從而產生一個新的酶切位點，以區分拯救毒和野毒方法，成功拯救出1株犬流感病毒。影響流感病毒傳染性和致病性的分子機制，可能是一種多位點和/或多基因協同作用的結果，而只有這種協同作用達到一個最佳的“狀態”時，才能保證病毒在高效地複製和傳播，並引起動物死亡。通過貓、犬和小鼠犬流感病毒感染模型分析，犬流感病毒可以使貓、犬和小鼠感染上犬流感病毒，雖然只出現一定程度的臨床症狀並不致死，在一定時間內可以自行清除，但是犬流感病毒具有跨宿主傳播的風險。另外，從受體角度分析犬源流感能否能適應新宿主——犬，從而為犬源流感及人犬源流感的預防和控制、犬源流感大流行的預警、新型的基因工程修飾或致弱流感疫苗的研製及新的抗流感藥物的研製提供全面、準確、直接的科學依據和研究基礎。