牙周膜CREB磷酸化在正畸牙移動成骨中的作用

《牙周膜CREB磷酸化在正畸牙移動成骨中的作用》是依託武漢大學，由林恆擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：牙周膜CREB磷酸化在正畸牙移動成骨中的作用
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：林恆
• 依託單位：武漢大學

項目摘要

正畸牙移動牽張側出現新骨形成的機制尚未明確。CREB是一種磷酸化依賴性的轉錄因子，調控多種細胞生長因子及趨化因子的表達。項目組前期研究發現，CREB磷酸化特異性發生在小鼠正畸牙移動模型牽張側的牙周膜細胞中，同時體外模型中周期性張應力的牙周膜細胞CREB表達及磷酸化水平上調。項目組提出假設：牙周膜細胞CREB磷酸化在正畸牙移動牽張側的成骨過程中發揮重要作用。通過生物信息學預測結合表達譜晶片結果sdf1、fgf2為CREB潛在靶基因。首先檢測體內外牙周膜牽張應力條件下CREB的表達及磷酸化，檢測sdf1、fgf2表達，分析CREB磷酸化與sdf1、fgf2的相關性；分別在牙周膜細胞中過表達CREB和抑制CREB後檢測牙周膜細胞條件培養基對骨髓基質細胞遷移、成骨向分化的作用，檢測下游潛在靶基因sdf1、fgf2表達。進一步用雙螢光素酶實驗、染色體免疫共沉澱實驗檢測CREB對靶基因結合與調控作用。

結題摘要

牙在正畸力作用下在牙槽骨中移動過程中,其牽張側出現新骨形成的機制還不明確。CREB是一種磷酸化依賴性的轉錄因子，調控多種細胞生長因子及趨化因子的表達。課題組通過牙周膜細胞體外周期性牽張力模型mRNA晶片數據的網路分析發現，CREB是其中網路調控中多個重要中心的一員。通過進一步的驗證，我們發現CREB在周期性張應力的牙周膜細胞中表達及磷酸化水平上調。為探討張應力狀態下的牙周膜細胞CREB磷酸化在正畸牽張成骨過程中的作用，我們同時建立小鼠正畸牙移動的模型，通過real-time PCR，western blot和免疫組織化學方法檢測體內外牙周膜牽張應力條件下CREB表達及磷酸化上調。在體外模型中我們發現，在牙周膜細胞中過表達CREB可以使牙周膜細胞分泌促進骨髓基質幹細胞遷移的細胞因子。其中通過對細胞上清的檢測，我們發現FGF2和SDF1的蛋白水平升高。在小鼠模型中，我們也發現FGF2和SDF1在牙周膜牽張側出現表達上調。 通過過表達和抑制CREB實驗我們發現，CREB可促進FGF2和SDF1表達上調。CREB，作為一個轉錄因子，可以通過轉錄調控FGF2和SDF1促進他們的表達。本研究結果對揭示牙周膜細胞CREB磷酸化可促進骨髓基質幹細胞的遷移，在正畸牽張成骨的調控機制有重要作用。