《瀰漫性軸索損傷分子標記物的研究》是依託華中科技大學，由周亦武擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：瀰漫性軸索損傷分子標記物的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：周亦武
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
瀰漫性軸索損傷（DAI）是一類重要的致死性腦損傷，其診斷標準尚不統一。軸索收縮球（RBs）及β-APP免疫染色是目前常用的DAI法醫病理學診斷標記，但它們均存在一定缺陷，造成漏檢及假陽性，因此尋找DAI不同時間段特異性分子標記物成為法醫學亟待解決的課題。本課題在前期研究基礎上，擬從兩方面深入開展DAI分子標記物的研究：一方面，通過複製大鼠DAI模型，套用多種分子標記物（β-APP、Aβ、NF、MAP-tau、C-tau、α-II spectrin 、FE65、tubulin、MBP、CD68等），對DAI易發部位進行免疫組織化學檢測，綜合比較研究結果，確定DAI不同時間段特異性分子標記物。另一方面，在動物研究基礎上，對本單位DAI屍檢標本，進行分子標記物免疫組織化學研究，確定人DAI特異性分子標記物，補充、完善目前基於RBs及β-APP標記的法醫病理學DAI的診斷標準，服務於法醫實踐。
結題摘要
瀰漫性軸索損傷（DAI）是一類重要的致死性腦損傷，目前法醫病理學檢查仍然是DAI確診的唯一手段，然而僅憑單一指標的免疫組化檢查（如β-APP），用以診斷DAI及其傷後時間推斷明顯不足，因此尋找診斷創傷性軸索損傷(TDAI)的多種分子標記物，建立同時具備提示“創傷”及“軸索損傷”的聯合使用指標，並根據分子標記物的表達變化判斷傷後時間，是DAI研究中亟待解決的重點與難點課題之一。本課題致力於尋找DAI損傷後時間特異性分子標記物，補充、完善法醫病理學DAI的診斷標準，服務於法醫實踐。首先，我們採用經典的Marmarous模型建立DAI大鼠模型，為確保後期實驗的順利開展，本研究利用傳統DAI分子標記物免疫組織化學方法，結合Morris水迷宮實驗驗證大鼠DAI模型，篩選造模成功的腦組織進行後續實驗。在前期造模成功的基礎上，本課題組從兩方面深入開展DAI分子標記物的研究：一方面，利用iTRAQ技術完成大鼠DAI急性期胼胝體各時間點(1h、3h、6h、12h、24h、48h及72h)差異蛋白的篩選，共篩選出包括PRPH、CSEN、Igκ light chain C等在內的19種共有差異蛋白，確定了能套用於診斷並損傷時間推斷的潛在分子標記物。另一方面通過Western blot免疫印跡技術、免疫組織化學染色及免疫螢光染色驗證了所選差異蛋白作為推斷DAI損傷時間的生物分子標記物的可行性。
