《活性多糖的口服吸收以及轉運代謝機制研究》是依託中國海洋大學，由呂志華擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：活性多糖的口服吸收以及轉運代謝機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：呂志華
- 依託單位：中國海洋大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
由於多糖多種多樣的生物活性功能，使其作為功能食品的功效成分和中藥藥效成分已有大量套用，並使多糖生物資源的研究開發日益活躍。與大量多糖活性研究報導相比，有關多糖口服吸收轉運代謝方面的研究則僅見零星報導，迄今對多糖系統的口服吸收及轉運代謝研究未見報導。僅有的幾個有關多糖體內吸收的研究均表明多糖的生物利用度很低，如此低的生物利用度與大量報導多糖口服後體內活性研究中良好的結果之間到底是何關係？其吸收轉運的機制是什麼？其發揮活性作用的形式到底是什麼？上述問題均是活性多糖研究領域亟待解決的問題。本研究旨在以具有極好活性和典型結構的海參糖胺聚糖（HGAG）為研究對象，建立將具有一定分子量分布的多糖作為一個整體的靈敏分析方法，採用整體水平、器官水平和細胞水平的多種實驗模型和方法，系統研究HGAG的吸收轉運代謝過程，闡明HGAG口服後的吸收情況以及轉運代謝機制。也將為其他活性多糖的相關研究提供新的思路和方法
結題摘要
由於多糖多種多樣的生物活性功能，使其作為功能食品的功效成分和中藥藥效成分已有大量套用，並使多糖生物資源的研究開發日益活躍。與大量多糖活性研究報導相比，有關多糖口服吸收轉運代謝方面的研究則僅見零星報導。僅有的幾個有關多糖體內吸收的研究均表明多糖的生物利用度很低，如此低的生物利用度與大量報導多糖口服後體內活性研究中良好的結果之間到底是何關係？其吸收轉運的機制是什麼？其發揮活性作用的形式到底是什麼？上述問題均是活性多糖研究領域亟待解決的問題。本研究以具有極好活性和典型結構的海參糖胺聚糖（HGAG）為研究對象，以生鮮仿刺參(Apostichopus japonicus)為原料提取HGAG，製備系列低分子量DHGs，並確定HGAG的精細結構，研究HGAG在口服吸收的主要場所的穩定性，利用Caco-2細胞模型研究HGAG的吸收轉運機制。主要研究成果如下： 1、最佳化建立了仿刺參糖胺聚糖的提取、純化方法，獲得了分子量固定、純度高的一類以-[4GlcAβ(Fuc2,4Sα1-3)1-3GalNAc4,6Sβ1]n-為重複三糖結構的新穎結構的海參糖胺聚糖（HGAG）。 2、最佳化建立了銅離子誘導的H2O2自由基降解HGAG的方法，獲得了分子量分布窄、純度高的系列低分子量海參糖胺聚糖（DHGs），且降解過程中，糖胺聚糖的主鏈結構、支鏈結構和硫酸基取代均沒有發生顯著變化。 3、建立了適用於生物樣品中HGAG分析的高效液相色譜柱後衍生法，該方法能滿足將一定分子量分布的多糖作為一個整體進行定量測定的檢測要求，靈敏度較高、精密度、準確性良好。 4、HGAG在人工胃液、大鼠空白腸循環液以及在大鼠單向腸灌流模型中，其分子量、含量、硫酸根均未發現明顯變化，即HGAG在胃腸消化過程中是穩定的。 5、HGAG不會被Caco-2細胞模型攝取，AP-BL以及BL-AP方向均未發現其被細胞單層跨膜轉運，P-gp抑制劑維拉帕米對其AP-BL方向的吸收無影響。 6、各低分子量的DHGs未發現被Caco-2細胞單層跨膜轉運，在細胞內也沒有檢測到DHGs原型及降解產物，但AP側的濃度均有降低，且具有時間依賴性和濃度依賴性，DHGs部分粘附在細胞膜上。 上述研究結果表明HGAG及低分子量DHGs均不能被Caco-2細胞單層跨膜轉運，那么多糖口服後是如何產生體內活性的仍是我們要研究的一項重要課題。
