油紅O脂肪染色法

油紅O脂肪染色法是指在日常病理診斷和科研工作中為了顯示組織內的脂肪常採用油紅O進行染色的方法，油紅O為脂溶性染料，在脂肪內能高度溶解，可特異性的使組織內甘油三酯等中性脂肪著色。

引言

套用過程中發現,配製該染液所用的丙酮和異丙醇容易揮發,致使染液產生沉澱,染色時易在組織切片上留下紅色的結晶,給染色結果的準確判斷帶來很大影響。為此,我們對染液配方進行了改進,收到較好效果。

材料和方法

1.標本　人或動物的肝組織等,甲醛—鈣液固定,冰凍切片,厚10μm。

2. 改良的油紅O染色液　油紅O 0. 5g, 50%乙醇100ml。將油紅O溶於乙醇內,且不斷攪拌至完全溶解即可。配製好的染液置磨口瓶內保存備用。

3. 染色步驟　①切片乾燥後入50%乙醇稍洗;②油紅O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自來水終止分化;④蘇木素復染核,自來水返藍,甘油明膠封片.

結果

肝細胞內的脂肪滴呈紅色,細胞核呈藍色。

圖　肝脂肪變性:脂肪滴呈紅色,細胞核藍色。　改良
油紅O染色法×400

討論

傳統配製油紅O染液,所用的丙酮和異丙醇極易揮發,致使染液產生沉澱,染色時易在組織片上留下紅色的結晶,而影響結果的判斷。同時染液不易保存,每次染色時需要重新配製。我們經實驗,採用50%乙醇作為溶解劑,減少了丙酮和異丙醇易揮發對人體的危害,染液不易產生沉澱;分化劑與油紅O染液中的溶劑性質相似,這樣利於切片上多餘染液的分化,故組織切片上沒有結晶產生。從而為病理診斷及鑑別診斷提供了可靠技術方法。組織常規用中性福馬林固定,但用甲醛—鈣液(40%甲醛10ml,蒸餾水90m1,氯化鈣1g)固定效果更好,這樣有利於保存磷脂。

封固顯示脂肪的切片時,切片不宜太乾,否則易產生氣泡。發現有氣泡,不能壓蓋玻片驅趕,因為這樣會使脂滴移位。若有氣泡可用溫水浸掉蓋玻片,而後再封固。

該方法操作簡便,染色結果鮮艷,染液可反覆使用。