《水稻SNARE蛋白OsSYP121參與抗病過程機理研究》是鮑永美為項目負責人，南京農業大學為依託單位的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：水稻SNARE蛋白OsSYP121參與抗病過程機理研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：鮑永美
- 依託單位：南京農業大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
本課題組已從廣譜高抗稻瘟病水稻地方品種黑殼子粳中分離了一個SNARE蛋白基因OsSYP121，利用農桿菌介導的轉基因技術將該基因轉化感病品種蘇御糯中，轉基因水稻對稻瘟病的抗性顯著增強。本研究擬通過比較OsSYP121基因在抗、感品種中的序列和表達差異分析其與抗病性的關係；通過組織解剖和顯微觀察等手段分析OsSYP121轉基因水稻抗病性增強的機理；在系統分析OsSYP121轉基因水稻植株對稻瘟病抗性特徵基礎上，利用酵母雙雜交、SDS-PAGE-質譜鑑定、蛋白質組學和基因晶片等實驗手段鑑定轉基因水稻中OsSYP121的互作蛋白和下游蛋白（基因），通過分析編碼這些蛋白質基因在稻瘟病菌處理前後的表達情況，初步闡明水稻OsSYP121蛋白介導的抗稻瘟病機理及抗病信號途徑，為水稻抗病分子育種提供理論依據。
結題摘要
項目超額完成預期目標，明確了OsSYP121參與抗稻瘟病過程的作用，投稿和發表論文5篇，其中SCI論文3篇；申報專利3項，其中授權1項；編寫專著1部；培養博士研究生2名，碩士研究生3名。取得的主要成果包括一下四個方面： （1）OsSYP121為OsSYP1s家族中特異回響稻瘟病菌處理的基因。克隆了OsSYP1s家族OsSYP121的4個同源基因，4個基因的表達分析結果表明，只有OsSYP121的表達明顯受到稻瘟病菌處理誘導，亞細胞定位結果表明OsSYP121和OsSYP132均定位於細胞膜上，而OsSYP111和OsSYP124主要定位於高爾基體上。 （2）OsSYP121的基因序列在不同品種中是高度保守的。本研究對32個抗、感品種中OsSYP121基因的序列和表達進行比較分析結果表明，OsSYP121基因序列在測試水稻品種中100%一致，啟動子序列存在差異，32個品種中共存在5種序列啟動子，5種啟動子序列啟動基因的表達模式存在差異。 （3）OsSYP121參與抗病的機理主要是抑制稻瘟病菌的侵入。對OsSYP121轉基因植株的抗性鑑定結果表明，轉基因植株對稻瘟病菌的抗性主要體現在抗侵入水平，表現為病斑數目比對照明顯減少，進一步通過Uvtex-2B染色顯微觀察的方法發現轉基因植株中稻瘟病菌孢子的侵入受到明顯抑制，OsSYP121主要在稻瘟病菌侵入時起作用。 （4）與OsSYP121互作形成複合體的成員為OsSNAP32、OsVAMP714以及OsVAMP724。通過酵母雙雜交的方法篩選驗證與OsSYP121 形成複合體的成員發現，與其互作成員為OsSNAP32、OsVAMP714以及OsVAMP724。
