毛蕊花苷的體內代謝及其降血尿酸水平的分子機制研究

《毛蕊花苷的體內代謝及其降血尿酸水平的分子機制研究》是依託南昌大學，由萬茵擔任項目負責人的地區科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：毛蕊花苷的體內代謝及其降血尿酸水平的分子機制研究
• 項目類別：地區科學基金項目
• 項目負責人：萬茵
• 依託單位：南昌大學

項目摘要

血中尿酸過多和自由基的存在易引發包括痛風在內的多種疾病。通過科學飲食調控血中尿酸水平一直是國內外研究熱點。苯乙醇苷類物質來源廣泛、功能多樣，長久吸引著藥物研發人員和保健食品研究人員的眼光。本課題組前期實驗表明毛蕊花苷降尿酸水平與其抑制黃嘌呤氧化酶活性存在相關性。本項目為研究毛蕊花苷抑制黃嘌呤氧化酶活性的機理，採用HPLC-MSn技術鑑定灌胃給藥的毛蕊花苷在大鼠各組織內的代謝產物化學結構，通過HPLC對代謝產物定量以分析毛蕊花苷的體內代謝過程，並基於黃嘌呤氧化酶結構中的催化活性位點在分子水平上探討毛蕊花苷及其代謝產物抑制黃嘌呤氧化酶活性的機理，為服用功能食品預防高尿酸血症提供理論基礎。本項目的研究成果亦可為其它苯乙醇苷類物質的體內代謝過程和降尿酸功能研究做出貢獻。

結題摘要

通過科學飲食調控血中尿酸水平一直是國內外研究熱點。毛蕊花苷是植物性資源的重要成分。本項目分析了毛蕊花苷的體內過程，鑑定了毛蕊花苷經體外模擬消化和體內灌胃給藥後的代謝產物化學結構，推測其體內代謝反應，並在分子水平上探討了毛蕊花苷及其代謝產物體內外抑制黃嘌呤氧化酶活性的機理。本項目的研究成果為服用保健食品來源預防高尿酸血症提供了理論基礎,亦可為其它物質和日常食品成分的體內代謝過程和降尿酸功能研究提供借鑑。 1、通過回響面分析法得到從車前子中提取苯乙醇苷的乙醇回流提取和超聲提取的最佳工藝條件。最佳化了利用大孔吸附樹脂對車前子提取液的純化工藝參數，從車前子原料可獲得含量80%的精製物，得率0.61%。 2、對氧嗪酸鉀致高尿酸血症模型SD大鼠灌胃毛蕊花苷，其肝臟黃嘌呤氧化酶活性有明顯抑制作用，血尿酸水平下降明顯，尿素氮和肌酐兩個指標與正常組無明顯差異。說明給藥毛蕊花苷對大鼠高尿酸血症有防治作用，且對大鼠的腎、肝等組織未產生損傷。 3、採用紫外分光光度法測定毛蕊花苷的濃度，結合搖瓶法，正辛醇-水系統測定毛蕊花糖苷的油水分配係數為0.273，log P=0.566 (n=3)，表明毛蕊花糖苷易溶於水。 4、灌胃給予定量的毛蕊花苷，檢測到毛蕊花苷在30min內即可達到血液峰值，15-120 min大鼠體內各組織的毛蕊花苷含量以胃和小腸中最高，而心、肝、脾、肺、腎和血漿含量很低。因此毛蕊花苷的消化吸收率較低。 5、採用HPLC及LC-MS技術對毛蕊花苷體外模擬消化產物進行了研究，結果表明有少部分毛蕊花糖苷在人工消化液的作用下發生酯鍵及糖苷鍵的斷裂，大部分仍保持毛蕊花糖苷原型。通過UPLC-QTof-MS2從尿液中鑑定出毛蕊花糖苷的數個代謝產物，可以看出毛蕊花糖苷在體內主要發生了‖相代謝反應包括甲基化、硫酸化、葡萄糖醛酸化等。 6、通過紫外分光光度儀、高效液相色譜儀、圓二色譜儀、螢光色譜儀等手段掃描毛蕊花苷和黃嘌呤氧化酶的孵育體系中相關光譜行為，發現游離毛蕊花苷的量隨著孵育時間的增加而減少，酶蛋白結構和行為發生變化，表明毛蕊花苷和黃嘌呤氧化酶發生了分子間結合。 7、體內外試驗結果表明其主要代謝產物具有一定的降血尿酸和抑制黃嘌呤氧化酶活性作用。 8、研究了85種日常果蔬、穀物雜糧的醇提物對黃嘌呤氧化酶活性的抑制作用，發現部分常見果蔬還可體內抑制黃嘌呤氧化酶，降低模型小鼠血尿酸水平。