《死亡受體5在C/EBPα誘導肝星狀細胞凋亡中的作用及機制》是依託復旦大學，由梅雙擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：死亡受體5在C/EBPα誘導肝星狀細胞凋亡中的作用及機制
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：梅雙
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
本課題組以往研究表明:與脂肪細胞分化密切相關的C/EBPα在肝星狀細胞（HSCs）激活後表達明顯降低，體內外轉染C/EBPα基因促進激活的HSCs向具有脂滴的靜息的HSCs逆轉及抑制HSCs增殖實現抗肝纖維化作用。我們的研究也初步證明C/EBPα具有誘導激活的肝星狀細胞系（HSCs-T6）凋亡的作用，其機制可能主要通過PPAR-γ和P53上調死亡受體5（DR5）。過表達C/EBPα是否在誘導自然激活的原代培養HSCs及纖維化肝中HSCs的凋亡中起重要作用？如果是，其機制是否主要通過DR5凋亡信號途徑、而DR5表達上調是否通過C/EBP同源蛋白（CHOP）途徑實現的，是本課題主要研究目的。因此，本研究擬在前二個國家自然科學基金課題研究結果基礎上，通過體內外研究回答上述科學問題，以期深入闡明體內外轉染C/EBP-α基因誘導激活的HSCs凋亡及抗肝纖維化的作用及機制,為肝纖維化防治提供新的方案。
結題摘要
CCAAT增強子結合蛋白α（C/EBP-α）是一種核轉錄因子，它可以調控脂肪細胞的分化。我們前期研究發現C/EBP-α可以在體內外誘導肝星狀細胞的凋亡，但是它對肝細胞有何影響尚不清楚。本研究旨在探討C/EBP-α誘導凋亡的作用在肝星狀細胞和肝細胞中是否存在差異。我們構建了腺病毒介導的C/EBP-α基因（Ad-C/EBP-α），用Ad-C/EBP-α分別感染大鼠肝星狀細胞系（HSC-T6）和肝細胞系（BRL-3A）。我們還採用腹腔注射CCl4建立了小鼠的肝纖維化模型。研究結果顯示C/EBP-α在體外誘導肝細胞和肝星狀細胞凋亡存在顯著差異。線粒體途徑參與這種C/EBP-α誘導的凋亡作用，而且在T6細胞為主要的凋亡途徑。給CCl4誘導肝纖維化的小鼠注射Ad-C/EBP-α，可以減少細胞外基質，包括膠原和羥脯氨酸含量，並且肝損傷指標γ-GT的水平顯著下降。取小鼠肝組織做免疫組化和TUNEL分析，結果也顯示肝星狀細胞凋亡增加，而肝細胞受到較少影響。總之，本研究證實了C/EBP-α在體內外都有誘導肝星狀細胞凋亡作用，而對肝細胞沒有明顯不良影響，這為以後開發高選擇性抗肝纖維化藥物提供新的靶點依據。另外，我們初步證實C/EBP-α蛋白有乙醯化現象。以往只有報導在胰腺癌中C/EBP-α基因存在乙醯化修飾，這是首次發現C/EBP-α蛋白存在乙醯化，我們打算進一步探究C/EBP-α蛋白乙醯化對肝星狀細胞的影響及其機制。
