樹突細胞介導的骨免疫機制在股骨頭壞死中的作用研究

《樹突細胞介導的骨免疫機制在股骨頭壞死中的作用研究》是依託西安交通大學，由黨曉謙擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：樹突細胞介導的骨免疫機制在股骨頭壞死中的作用研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：黨曉謙
• 依託單位：西安交通大學

中文摘要

激素性股骨頭壞死（SANFH）確切發病機制的相關研究具有極其重要的臨床意義。我們前期有關SANFH和骨免疫學的研究提示SANFH早期病理進程中出現的骨細胞缺血性壞死及血管損傷有免疫系統的參與。樹突細胞（DCs）是多種免疫反應啟動子和參與者。DCs與SANFH 的發病可能通過內環境因素、細胞組分互相作用及免疫應答異常等機制密切聯繫。我們以骨組織免疫學為切入點，以樹突細胞為研究核心，通過構建樹突細胞分離擴增分化培養體系、多細胞共培養體系，通過分子影像學示蹤和重組腺病毒體外標記回輸技術進行動物模型體內研究；分離鑑定模型體內樹突細胞，測定相關基因組及蛋白組學表達水平，從分子、細胞及器官等多層面對SANFH與骨組織免疫學的相關性進行探討，系統研究樹突細胞在SANFH發病過程的物理空間定位、功能定位、生物行為變化及對其他細胞組分影響，為SANFH發病機制研究提供實驗基礎和診療新理論

結題摘要

SANFH的早期病理進程中出現的骨細胞缺血性壞死很可能有免疫系統的參與。因此，本研究試圖探索性地從骨免疫學角度探討SANFH早期造成骨細胞大量壞死的可能機制，以期為診斷治療早期SANFH提供可行的新的診斷治療靶點。本項目實施後，必將對SANFH發病機制研究提供堅實的理論和實驗基礎，並可根據本研究成果在後續治療層面開展實驗性臨床研究，具有極其重要的理論意義和套用前景。本研究主要有以下幾個方面：1.體外分離培養樹突細胞，體外模擬激素化對樹突細胞功能的影響；2.研究樹突細胞和成骨細胞的相互作用關係，以明確在SANFH發病過程中樹突細胞變化對成骨細胞的增殖及分化的影響；3.體內實驗研究分離鑑定股骨頭病變區域樹突細胞的表達和分布情況。研究表明，10-8濃度的地塞米松即可對樹突細胞的表型產生影響，隨著地塞米松濃度的增加，成熟樹突細胞（CD11c+MHC II+CD86+）的比例逐漸增加，通過採用樹突細胞誘導成骨細胞表明，樹突細胞的成熟比例增加會導致鹼性磷酸酶水平降低，茜素紅S染色顯示鈣沉積和結節形成減少，具有統計學差異（P＜0.05）。RUNX2，COL1，ALP和OCN成骨分化相關基因明顯下降，具有統計學意義（P＜0.05），而凋亡檢測並無顯著性差異（P＞0.05）。體內實驗表明，股骨頭壞死區域並未發現樹突細胞分布，這可能與樹突細胞數量較少或者抗原丟失有關，表明激素化的樹突細胞並不通過誘導成骨細胞凋亡而誘發SANFH，其機制可能是通過增加成熟樹突細胞比例，從而抑制成骨細胞成骨，尚需進一步證實。