同一放射性核素可以具有多種不同價態，因此形成不同化合物。為了描述同一放射性核素的各種化學形態之間的相對數量關係，定義了放射化學純度的概念，又稱為標記率。放射性核素標記化合物的活度占總投入放射性活度的百分比。常用的測定方法有放射性紙層析、薄層層析、柱層析和蛋白沉澱法等。
基本介紹
- 中文名：標記率
- 外文名：labelingyield
層析法,沉澱法,
層析法
層析法在化學和生意醫學中套用非常廣泛的一種分離、分析方法。它具有簡便、快速、靈敏度高、分辨力強、適用範圍廣的優點。層析法一般可分為紙層析法、薄層析法和柱層析法。
（1）紙層析法：紙層析法是各種層析法當中最為簡便的一種，它以濾紙作為支持體，以適當的溶劑作為流動相的分配層析法。紙層析按操作方法不同可以分為單向法、雙向法、圓形法以及上行法、下行法。
以單向上行法為例。首先將濾紙裁剪成20cm*2cm的條，然後將待分析樣品用毛細血管吸取，並浸潤與濾紙條距其一端約2cm的原點上。待浸潤點乾燥之後，將濾紙懸掛與層析缸中。懸掛時將濾紙的原點端浸入展開劑中，原點離展開劑液面的距離至少應為1cm。這是展開劑由於毛細管作用驅使而向上浸潤，並帶動原點上的樣品組分向上運動。各組分在濾紙上將處於不同的位置，達到了分離的目的。層析結束後，將濾紙取出，令其自然乾燥，然後用特異性顯色劑噴灑在濾紙上，則樣品組分在不同位置將顯示出色斑。再對濾紙進行分段放射性計數測定即可。
(2)薄層層析：薄層層析一般屬於固相液相層析，其固定相用某些固體物質粉末加入一定量粘合劑均勻塗在玻璃片上製成，可分為分配層析、吸附層析、離子交換層析、凝膠過濾層析等。
薄層層析的操作過程與紙層析相似，也包括點樣、展開、顯色、測定放射性分布等步驟。比紙層層析法相比，具有吸附容量大的優點，但操作麻煩。
沉澱法
沉澱法利用放射性核素的某一化學形態能與一定的試劑形成沉澱而與其他化學形態相分離的方法。
例如，測定放射性碘標記的蛋白質的放射化學純度，可以利用三氯醋酸把蛋白質沉澱下來而與游離的放射性碘分開。在實際操作中，由於碘化蛋白的濃度一般很低，因而應加入適量的載體蛋白，使碘化蛋白與載體蛋白共沉澱。另一方面，由於蛋白沉澱會對游離的放射性碘產生非特異性夾帶和吸附，容器壁也會對放射性發生一定程度的吸附，因而在沉澱之前還應加入一定量的非放射性碘。由於溶液中非放射性游離碘的濃度比放射性游離碘大得多，就能有效減少蛋白沉澱和容器壁對游離放射性碘的非特異性結合，增加分離效果，非放射性碘在這裡起了反載體作用。沉澱經離心分離後，先測定其總放射性計數率，吸棄上清液後再測定沉澱的放射性計數率，即可計算出碘化蛋白的放射性化學純度。
