1922年秋,在安源工人罷工鬥爭勝利的影響下和毛澤東派去的蔣先雲、謝懷德等宣傳發動下,水口山工人開始了有組織的工運鬥爭,楊發秀積極投身工人運動。11月27日,水口山工人俱樂部成立,楊發秀當選為工人代表,並擔任工人糾察隊分隊長。在工人運動的實際鬥爭中,楊發秀的思想覺悟不斷提高,1923年3月,他參加了毛澤覃、朱舜華舉辦的工人夜校特別班學習,受到革命理論的教育。同年5月,他加入中國共產黨。11月,水口山工人運動遭到反動礦警隊的鎮壓,根據黨組織的指示,楊發秀離開了水口山礦,轉移到長沙黑鉛冶煉廠開展秘密活動。
1925年5月,上海五卅慘案發生後,楊發秀受湖南省“青滬慘案雪恥會”負責人郭亮派遣,以特派員身份隨中共湘區委員會代表彭平之返回水口山,發動工人聲援五卅運動,重建被破壞的水口山工人俱樂部。6月13日,水口山工人開始大罷工。在彭平之等組織指揮下,礦工們列隊分四路向礦局進發,楊發秀親率800名礦工從五子堰向礦局衝去。反動礦局為了鎮壓這次罷工,出動礦警隊向工人開槍射擊,彭平之等十餘人遭逮捕,楊發秀亦因無法立足而被迫再次離開水口山,轉移至廣州,參加了國民革命軍。
1926年7月,楊發秀隨軍北伐。進入湘南後,奉部隊中共黨組織指示,楊發秀又一次回到水口山礦,協助礦山黨組織開展工人運動。9月7日,水口山礦工會成立,楊發秀當選為工會幹事,負責保衛工作。
1927年5月馬日事變發生後,楊發秀多次參加奪取礦警隊槍枝的戰鬥。
1928年1月26日,楊發秀參加了由中共水口山特別區委書記宋喬生領導的水口山工人武裝起義,並於3月下旬隨工農革命軍第一師獨立第三團進入耒陽,與朱德率領的湘南起義部隊會合,隨即向井岡山轉移。到達井岡山後,水口山工人武裝改編為中國工農紅軍第四軍軍部特務營,宋喬生任營長,楊發秀任連長。此後,他隨部隊參加了井岡山根據地的歷次“進剿”、“會剿”的戰鬥,並參加了開闢贛南、閩西革命根據地的鬥爭。在打贛州的戰役中,楊發秀身中數彈,卻帶傷堅持戰鬥,受到軍部的表彰。
1930年冬,受中共湘贛邊區特委派遣,楊發秀以中共湘南特委委員、水口山特別區委書記的身份,第四次返回水口山礦,開展地下鬥爭。
自水口山工人武裝隨湘南起義部隊上井岡山後,水口山工人運動在反動當局的血腥鎮壓下,一直處於低潮。楊發秀與地下黨員接上頭後,住進了半邊街的礦工生活區。他秘密串連工運骨幹,組成了一支有200多人的工人武裝隊伍。為了籌集槍枝彈藥,楊發秀欲通過已打入礦警隊做偵探工作的表兄朱承才購置武器。不料,這位大革命時期加入共產黨的表兄,此時已叛變革命,與礦警隊設下了誘殺楊發秀的詭計。
1931年9月16日,朱承才給楊發秀送來一部分子彈,並說還有四條槍埋在白毛沖,40塊銀元一支,約他第二天上山取槍。楊發秀信以為真,第二天帶著銀元到了白毛沖。當朱承才拿出兩條未裝子彈的步槍給楊發秀看時,早已埋伏在樹叢中的敵礦警突然向楊發秀一齊開槍。楊發秀胸膛連中數彈,搖晃了幾下,終於倒在了地上。
楊發秀壯烈犧牲了,出賣他的叛徒朱承才也沒有好下場。他被楊發秀殉難時視死如歸的英雄氣概嚇破了膽,導致精神錯亂,兩個月後死去。