核糖核苷二磷酸激酶（NDPK）基因在進化中高度保守,卻又呈現複雜多樣的生物學功能。該酶除了催化腺苷三磷酸（ATP）和核苷二磷酸（NDP）之間高能磷酸基團的轉移外,還具有NDP激酶活性和蛋白磷酸轉移酶活性,並參與轉錄調控和信號轉導。從家蠶蛹cDNA文庫中獲得家蠶核苷二磷酸激酶的cDNA序列,該cDNA序列長575bp,含465bp的開放閱讀框序列,編碼154個胺基酸殘基的核苷二磷酸激酶。將克隆的家蠶核苷二磷酸激酶基因插入pET-28a構建重組質粒,轉化大腸桿菌後誘導表達重組蛋白,經鎳離子親和層析柱純化得到重組家蠶核苷二磷酸激。
基本介紹
- 中文名：核糖核苷二磷酸激酶
- 外文名：NDPK
- 特點：在進化中高度保守
- 作用：激酶活性和蛋白磷酸轉移酶活性
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簡介
核糖核苷二磷酸激酶（NDPK）基因在進化中高度保守,卻又呈現複雜多樣的生物學功能。該酶除了催化腺苷三磷酸（ATP）和核苷二磷酸（NDP）之間高能磷酸基團的轉移外,還具有NDP激酶活性和蛋白磷酸轉移酶活性,並參與轉錄調控和信號轉導。從家蠶蛹cDNA文庫中獲得家蠶核苷二磷酸激酶的cDNA序列,該cDNA序列長575bp,含465bp的開放閱讀框序列,編碼154個胺基酸殘基的核苷二磷酸激酶。將克隆的家蠶核苷二磷酸激酶基因插入pET-28a構建重組質粒,轉化大腸桿菌後誘導表達重組蛋白,經鎳離子親和層析柱純化得到重組家蠶核苷二磷酸激酶。
相關資料
苷酸是合成DNA和RNA的前體；它們的衍生物是許多生物合成的活化的中間物；ATP是生物系統最通用的能量；腺苷酸是三種主要輔酶NAD+、FAD+和CoA的組分；核苷酸也是代謝調節物，例如cAMP是許多激素行使調節作用的細胞內信使。
嘌呤核苷酸的嘌呤環的原子分別來自谷氨醯胺（N9和N3）、甘氨酸（C4、C5和N7）、天冬氨酸（N1）、HCO3－（C6）和甲酸鹽（C8和C2）。嘌呤核苷酸的從頭合成分為兩個階段。第一階段是以來自磷酸戊糖途徑的核糖-5-磷酸作為起始物經過11個酶促反應步驟合成次黃嘌呤核苷酸（IMP）。第二階段是在IMP基礎上分別合成腺嘌呤核苷酸（AMP）和鳥嘌呤核苷酸（GMP）。AMP和GMP分別可以進一步磷酸化形成ADP、ATP和GDP和GTP。
嘧啶核苷酸的嘧啶環的原子分別來自天冬氨酸（C4、C5、C6、和N1）和氨甲醯磷酸（C2和N3），而氨甲醯磷酸在動物體內是由谷氨醯胺和HCO3－合成。嘧啶核苷酸的從頭合成是先合成尿嘧啶核苷酸（UMP），然後再磷酸化生成UDP和UTP。胞嘧啶核苷三磷酸（CTP）是在UTP基礎上由谷氨醯胺提供醯胺基合成的。
催化腺嘌呤核苷酸從頭合成第一步反應的5-磷酸核糖焦磷酸轉醯胺酶是一種別構酶，該酶的活性受其終產物AMP和GMP反饋抑制。此外，AMP和GMP亦可分別對由IMP合成AMP和GMP的第一步反應造成反饋抑制。
相關資料
http://jpkc.whu.edu.cn/jpkc2007/swhx/Course/news_show.asp?id=114
http://www.weibochem.com/cpkcn/vi719536.html
