柱層析儀器

柱層析儀器簡介

液相色譜法是生化研究中最常用的分離分析方法之—。而柱層析系統儀器則是液相分離分析不可色缺少的裝置。這套儀器—般應包括下列儀器：能獲得洗脫溶劑按一定要求改變其濃度的梯度混合器；能驅使溶劑按恆定流速流過柱體的恆流輸液泵(例如蠕動泵)；能檢測並記錄柱體流出液濃度變化的各種檢測據以及能定容、定時或計滴收集各部分的部分收集器。如再月一台程式控制器(或微機系統)定時地起動和終止上述各部件工作，並控制電磁閥以切換溶劑的種類及流路，就可按需要的任何方式組合成一套自動(或半自動比)的液相層析裝置。這套系統裝置的示意圖見圖3.1。

常見柱層析儀器

梯度發生器

梯度洗脫和梯度的形式在進行校層析時，樣後要用足夠量的起始緩衝溶液淋洗，使末吸附的物質洗出，並使
充分平衡，特別是用稀釋法處理的樣品更為必要。然後根據實驗要求、再進行梯度洗脫或階段洗脫。

微量泵

微量泵是一種可自動加液或抽液、加壓或抽壓的實驗室常規設備。它是液相色譜中不可缺少的部件。它的基本原理很簡單：由一可作無級調速的步進電機驅動一組滾輪，擠壓—根矽橡膠管，使層析溶劑以恆定的流速通過層析柱，改變電機速度或採用不同內徑的矽橡膠管，可使流速在適當範圍內任意調節。

檢測儀

在液相色譜中，最常用的檢測器是紫外檢測器，多用低壓汞燈作光源，提供254nm單波長檢測用，如再附加一根特製的石英磷游標作為波長轉換器，則可成280nm檢測器。

部分收集器

部分收集器可與層析柱、層析儀、檢測器和電泳儀等分離分析儀器配套使用。自動地對所需液體進行各種方式的收集，從而省掉化學分析製備工作中大量繁瑣的勞

程式控制器

由於柱層析時間較長，需要有能在數分鐘至數十小時內按時間或條件控制10個通路左右的程式控制器。利用這種程式控制器可按需要編排各種不同的工作程式，使它所控制的泵、閥、梯度發生器、檢測器及收集器等協調地啟動或終止工作。這樣就可使儀器預熱，柱體用甲乙兩種溶液預洗，加樣後梯度洗脫，洗脫液自動檢測及收集，再用甲乙兩種溶劑回收柱體，廢洗滌液自動流入廢液收集瓶，以及循環操作或工作完畢自動停機等工作程式準時地依次完成。它的作用相少於汁算機中的“中央處理機”，是十分重要的。

層析拄

一般柱層析中大多採用帶下口的玻璃管作為層析拄。

1、中壓層析系統如 bio-rad NGC™ 和 BioLogic DuoFlow™ 系統。

2、重力和離心層析柱：Econo-Pac 和 Poly-Prep 重力流空柱非常適合樣本、緩衝液的製備以及重力流層析套用。

3、Aminex® 糖分析柱Aminex 有機酸和乙醇分析柱。低壓層析系統，如 BioLogic LP 和 Profinia 蛋白純化系統。

電磁閥

一切換液體流路用的電磁閥有兩路通斷閥及三路兩通切換閥等。

柱層析儀器

基本介紹