《果蠅Yippee基因在心臟發育中的功能研究》是依託湖南師範大學，由萬永奇擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：果蠅Yippee基因在心臟發育中的功能研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：萬永奇
- 依託單位：湖南師範大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
果蠅Yippee基因是在真核生物中廣泛存在並高度保守的心臟發育候選基因，其人類同源基因YPEL1的缺失導致心血管發育缺陷，但Yippee基因在心臟發育中的具體功能及分子機制尚不明確。申請人的前期研究顯示，Yippee通過與MVP相互作用參與調控MAPK信號通路，並建立了該基因的轉基因果蠅模型。申請者擬進一步利用基因敲除、過表達和RNAi果蠅模型分析Yippee失活、下調或異位表達後的心臟發育與心肌細胞分化表型，以及該基因能否挽救這些表型；並在細胞水平分析Yippee過表達或沉默後心肌細胞分化表型的變化，尋找Yippee通過MAPK途徑影響的下游心臟發育相關基因，在細胞與整體水平闡明Yippee基因的生物學功能。通過上述研究，有望明確Yippee基因在心臟發育中的具體功能及其分子機制，為人類心血管發育缺陷的發病機理提供線索。
結題摘要
果蠅Yippee基因是在真核生物中廣泛存在並高度保守的心臟發育候選基因，其人類同源基因YPEL1的缺失導致心血管發育缺陷，但Yippee基因在心臟發育中的具體功能及分子機制尚不明確。本項目利用果蠅作為模式生物，通過基因敲除、基因敲減、異位表達等手段，研究Yippee基因在心臟發育中的功能及其分子機制。取得以下結果：通過原位雜交與胚胎抗體染色，發現Yippee基因主要在果蠅心臟中胚層表達，可能調控果蠅心臟發育；Yippee基因敲除或敲減都會導致果蠅心管的eve+副心肌細胞缺失，且這種表型能夠被Yippee基因及人YPEL4基因部分拯救，但在心臟中胚層過表達Yippee則不引起異常表型，Yippee失活引起的副心肌細胞缺失主要是由於副心肌增殖下降；Yippee基因敲除後CG1106、CG5119等基因表達發生變化，且通過RT-PCR與實時螢光定量PCR驗證了這些基因的表達變化，表明Yippee可能通過RNAi及細胞周期相關途徑調控心臟發育； Yippee基因與MAPK信號途徑成員MVP存在相互作用，且能夠強烈激活Elk-1的轉錄活性，利用免疫共沉澱結合質譜技術發現，Yippee與Fon、CG15676、E2F2等基因存在相互作用，並通過酵母雙雜交與免疫共沉澱驗證Yippee與這些基因之間的相互作用。通過以上結果，我們初步認為，Yippee基因主要通過影響果蠅副心肌前體細胞的細胞分裂而調控果蠅心臟發育。
