《杜氏鹽藻異養工程藻株的建立》是依託鄭州大學,由劉紅濤擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名:杜氏鹽藻異養工程藻株的建立
- 項目類別:青年科學基金項目
- 項目負責人:劉紅濤
- 依託單位:鄭州大學
- 批准號:30600006
- 申請代碼:C0104
- 負責人職稱:副教授
- 研究期限:2007-01-01 至 2009-12-31
- 支持經費:22(萬元)
項目摘要
克隆並鑑定人紅細胞葡萄糖轉運基因(Glut1)序列,將其克隆至本實驗室構建的杜氏鹽藻高效表達載體pHDun-EGFP,構建同源重組型杜氏鹽藻異養轉化載體pHDun-Glut1-EGFP。通過基因槍法,將上述構建的載體導入光合自養的杜氏鹽藻硝酸鹽還原酶(NR)營養缺陷型突變株中,在碳酸酐酶(CA)啟動子控制下,以鹽藻硝酸鹽還原酶基因作為篩選標記,通過杜氏鹽藻MAR序列介導進入杜氏鹽藻核基因組中使之發生高頻同源重組,使EGFP、Glut1得到表達,篩選穩定表達Glut1的鹽藻轉化株,從而建立杜氏鹽藻異養株。製備Glut1的siRNA及構建siRNA表達載體,轉化Glut1的鹽藻穩定表達株,進行葡萄糖轉運分析,進一步闡述Glut1基因在杜氏鹽藻異養株中的功能。此研究有助於進一步探索杜氏鹽藻自養株及異養株的代謝調控途徑,提高杜氏鹽藻的生長和繁殖速度,為杜氏鹽藻生物反應器的建立奠定基礎。