《朴樹抗炎活性物質的發現、結構改造與作用機制研究》是依託南京林業大學，由房仙穎擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：朴樹抗炎活性物質的發現、結構改造與作用機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：房仙穎
- 依託單位：南京林業大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
針對銀杏產品中銀杏酚酸易導致過敏（炎症反應）及其脫除困難的難題，以民間經驗“能有效防治漆酚過敏”的朴樹為研究對象，基於銀杏酚酸與漆酚結構及毒副作用相似的特點，對朴樹中具有抗炎活性的物質及其構效關係開展研究。根據體外抑制T細胞介導炎症反應的活性，對朴樹葉和皮中的有效成分進行分離、純化，選取對銀杏酚酸解毒作用最強的成分進行純品製備和結構解析；考察朴樹成分發揮抗炎作用時對磷酸酶SHP2等酶蛋白活化、下游信號轉導的影響，揭示朴樹成分與炎症細胞中SHP2等關鍵分子的結合作用，探明朴樹抗炎成分的作用靶點；基於該抗炎成分的分子結構以及靶蛋白的結構，通過計算機模擬，設計出與靶蛋白的特定部位具有更強靶向結合作用的衍生物，並對其抗炎活性進行比較，闡明朴樹成分抗炎作用的構效關係。研究成果有望獲得一種新型抗炎活性物質，為銀杏茶等產品的配伍，為銀杏酚酸炎症問題的解決及抗銀杏酚酸炎症化合物的設計提供理論依據。
結題摘要
通過比較不同地區的朴樹葉提取物的抗炎活性，選擇了貴州地區一個野生品種的朴樹作為研究對象。基於抗炎活性篩選，從朴樹葉中分離得到了14種單體化合物，通過對朴樹葉提取物的液質聯用檢測、以及單體的核磁共振分析共鑑定出16個化合物結構，分別為芹菜素-7-O-葡萄糖基葡萄糖苷、牡荊素-2''-鼠李糖苷、山奈苷、刺槐素-7-O-葡萄糖苷、β-谷甾醇、熊果酸、白樺脂醇、2,4-二羥基苯甲醛、2,4-二羥基苯甲酸、槲皮素、芹菜素、異牡荊素、牡荊素、蘆丁、葒草素和異葒草素。其中異牡荊素是朴樹葉中的主要黃酮類化合物，並且具有較好的抗炎活性，結構上區別於常見的氧苷黃酮，因此被用於銀杏酸（GA）的減毒活性研究。結果表明異牡荊素一方面能夠減輕GA導致的小鼠急性肝損傷，降低血清中的轉氨酶水平；另一方面可以抑制GA導致的小鼠接觸性皮炎，抑制炎症因子IL-2、INF-γ、IL-6和IL-17a的mRNA表達以及血清中TNF-α的分泌，促進GA誘導的活化T細胞的凋亡。基於T細胞的Western bloting實驗結果表明，異牡荊素能夠能夠上調JNK的磷酸化，抑制AKT的磷酸化，進而促進Con A活化的T細胞凋亡。通過分子對接發現異牡荊素和酪氨酸磷酸酶SHP2有相互作用，提示其抗炎作用機制可能與SHP2的功能有關。研究闡明了朴樹中抗炎活性物質的種類及結構組成，找到了能夠通過抑制T細胞介導的炎症減除GA毒性的成分；建立了一種銀杏酚酸的配伍減毒方法，為銀杏茶和白果等產品的減毒增效提供了可能。 當然，銀杏酚酸的致敏問題和毒副作用因人而異，在研究中也發現不同品系小鼠個體差異較大，銀杏酚酸不應成為阻礙銀杏葉和銀杏果等產品開發的絆腳石。但是，這種個體差異和不穩定性給項目研究帶來了很多麻煩，在今後的研究中可以選擇更加成熟的銀杏酚酸致敏模型，比如以明確的靶細胞和靶蛋白為研究對象。從朴樹葉甲醇提取物和異牡荊素對GA的減毒效果差異來看，朴樹葉中應該還存在其他活性更好的成分，沒能在本項目研究中一一解析，今後值得繼續針對朴樹葉中的抗炎成分進行研究，開發對GA減毒作用更好的產品。
