暗視場顯微鏡,工作原理,
暗視場顯微鏡
暗視場顯微鏡主要用於觀察結構和折射率變化有關的物體,如硅藻、放射蟲類、細菌等具有規律結構的單細胞生物以及細胞中的線狀結構,如鞭毛、纖維等。用暗視場顯微鏡還可觀察到物鏡分辨極限以下的質點,但不適用於觀察染色的標本。
工作原理
暗視場顯微鏡在構造上套用丁達爾現象(Tyndall phenomenon:當聚光光束射入溶膠時,從光束的側面可以看到一條發亮的光柱,在光的傳播過程中,光線照射到粒子時,如粒子直徑略小於入射光波長,則發生光的散射,每個微粒就成為一個發光點,從側面可以看到一條光柱。),裝配了一類特殊聚光器——暗視場聚光器,使入射光束,從聚光器斜向照明被檢樣品。由於照明光線與顯微鏡光軸形成較大的角度通過物場,或因聚光器的特殊構造,照明光線在聚光器頂透鏡或蓋片的上表面發生全反射,致使照明光線不能入射物鏡之內。但是,樣品被照明並發出反射光。鏡檢時,因不能直接觀察到照明光線,與光軸垂直的平面視場暗黑,在深暗的背景上能清晰地看到由散射光和反射光形成的明亮的物體影像,物像與背景造成極大的反差。視場內的樣品,被斜射光線照明,可從樣品各種結構表面散射和反射光線,看到許多細胞器的明亮輪廓,諸如細胞核、線粒體、液泡以及某些內含物等。如果是正在分裂的細胞,其各類紡錘絲和染色體亦可窺見。