《日本血吸蟲Cystatin分子在免疫逃避中的作用及其機制》是依託武漢大學，由何立擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：日本血吸蟲Cystatin分子在免疫逃避中的作用及其機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：何立
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
研究表明，寄生蠕蟲的胱抑素（Cystatin）能抑制性調控宿主的細胞免疫應答，可能是參與免疫逃避的重要分子，據此推測日本血吸蟲胱抑素可能也在免疫逃避中發揮重要作用。本研究在克隆日本血吸蟲胱抑素基因並表達重組蛋白的基礎上，將詳細了解其在日本血吸蟲生活史不同發育階段的表達水平，以及在組織、細胞的分布；並通過觀察胱抑素重組蛋白對小鼠DCs抗原遞呈的抑制、誘導抑制性細胞因子產生、誘導免疫調節性T細胞的分化增殖等，重點研究其對小鼠細胞免疫應答的抑制性調控作用；以及這種作用是否有助於日本血吸蟲在小鼠體內的生長、發育和生殖。最終闡明日本血吸蟲Cyctatin分子在免疫逃避中的作用及其分子機制。該項研究不僅將豐富感染免疫學的理論，也為今後針對這一靶分子研發抗血吸蟲病新藥和高效疫苗打下基礎，甚至能啟發我們利用這個重要功能分子為人類健康服務，例如治療人類自身免疫性疾病；改善器官或細胞移植的臨床效果等。
結題摘要
首次獲得編碼日本吸血蟲半胱氨酸蛋白酶抑制劑的一個新基因的全長cDNA序列，命名為 SjCystatin，它的開放閱讀框有306個鹼基，編碼101個胺基酸，其預測分子量為11.3 kDa，等電點 pI 為 6.95。其蛋白分子的胺基酸序列與曼氏血吸蟲和人類的I 型cystatin，即stefin具有高度同源性。該基因全長為376個鹼基，帶有三個外顯子和兩個內含子，在吸蟲及其宿主間高度保守；該基因在蟲卵、童蟲、成蟲均有轉錄，主要在蟲卵和成蟲期表達，定位在蟲卵內毛蚴中，並廣泛分布於蟲體體表和成蟲消化道的內上皮細胞；重組蛋白分子rSj-cystatin對蛋白酶活性具有很強的抑制活性，在37℃ 和pH7.4 的條件下，10μg重組蛋白每分鐘能抑制0.0517單位的木瓜蛋白酶活性；生物信息學分析該重組蛋白質不含信號肽，也沒有跨膜區，是個可溶性蛋白。rSj-cystatin不能誘導小鼠抗血吸蟲感染免疫保護性作用，對宿主體內血吸蟲的生長、發育和繁殖沒有明顯影響。rSj-cystatin 能進入到小鼠 DCs 的細胞漿中，並通過抑制其溶酶體中的半胱氨酸蛋白酶活性而抑制DCs對抗原的提呈作用，並能顯著誘導感染小鼠調節性T細胞 CD4+ CD25+ Foxp3+的增殖。推測該分子可能是一個日本血吸蟲源性免疫抑制因子，在血吸蟲免疫逃避中發揮摘要作用。此外，首次嘗試使用重組蛋白分子rSj-cystatin治療大鼠潰瘍性結腸炎獲得明顯效果，其機制可能是通過誘導大鼠T細胞免疫應答的抑制，尤其是抑制Th1型免疫應答，導致Th2應答偏倚。
