《新生兒Fc受體在自身免疫甲狀腺疾病中的表達及作用》是依託北京大學，由張楊擔任負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：新生兒Fc受體在自身免疫甲狀腺疾病中的表達及作用
- 項目負責人：張楊
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
自身免疫甲狀腺疾病（AITD）包括橋本甲狀腺炎（HT）和Graves病（GD）等。甲狀腺球蛋白抗體（TgAb）和甲狀腺過氧化物酶抗體（TPOAb）是AITD的標誌性抗體，也參與其發病機制，但具體致病機制不明確。近年發現一種免疫球蛋白G（IgG）的特異受體新生兒Fc受體（FcRn），其可在甲狀腺細胞表達。FcRn主要參與IgG的轉運。我們推測FcRn可轉運甲狀腺自身抗體進入甲狀腺細胞發揮細胞毒作用參與AITD的發病機制。擬收集病理為正常甲狀腺、HT和GD的甲狀腺組織行細胞培養：套用RT-PCR和Western Blot法測定FcRn表達；雷射共聚焦技術、transwell法觀察FcRn對TPOAb和TgAb的轉運能力；免疫電鏡膠體金法定位其表達位置；研究影響其表達的因素；阻斷FcRn表達後再次評價其對甲狀腺自身抗體的轉運能力。以闡明FcRn是否介導甲狀腺自身抗體的轉運而參與AITD發病機制。
結題摘要
背景：甲狀腺球蛋白抗體（ TgAb）和甲狀腺過氧化物酶抗體（ TPOAb）是橋本甲狀腺炎（HT）的標誌性抗體，二者均以免疫球蛋白G（ IgG）型為主。體外研究已證實，IgG型TgAb和TPOAb可通過抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用損傷甲狀腺濾泡細胞。甲狀腺球蛋白（Tg）儲存於濾泡腔內，甲狀腺過氧化物酶（TPO）亦表達於甲狀腺細胞頂面。因此甲狀腺濾泡的組織結構決定了Tg和TPO難以與循環中相應的抗體結合而發生免疫反應。新生兒Fc受體（FcRn）是IgG Fc受體的一種，可轉運IgG。因此我們推測FcRn可能通過介導IgG型TgAb和TPOAb的轉運而參與HT的發病機制。本研究 擬探討在正常和HT甲狀腺細胞中FcRn的表達、位置以及影響其表達的因素。 方法：分別收集手術切除的病理為正常和HT的甲狀腺組織各4例，進行體外細胞培養。採用逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）和蛋白免疫印跡（Western Blot, WB）法測定正常和HT細胞FcRn的表達。套用免疫電鏡膠體金法定位FcRn在甲狀腺細胞內的位置，採用免疫螢光法檢測甲狀腺細胞內吞的IgG型TgAb（TgAb IgG）及FcRn的表達位置。套用不同濃度的Th1和Th2細胞因子（IFN-γ、TNF-α和IL-10、IL-4）分別刺激甲狀腺細胞以觀察細胞因子對FcRn表達的調節。在Transwell小室中培養具有極性的原代甲狀腺細胞進行IgG型TgAb、總IgG的直接轉運的研究。 結果：甲狀腺組織表達FcRn。FcRn主要分布於甲狀腺細胞的細胞質、細胞膜、線粒體和囊泡內。人總IgG和IgG型TgAb均可以pH依賴的方式被內吞入甲狀腺細胞，並與甲狀腺細胞內FcRn存在共定位。FcRn在HT甲狀腺組織中的表達水平低於正常甲狀腺細胞。Th1和Th2細胞因子呈劑量依賴性下調正常甲狀腺細胞和HT甲狀腺細胞FcRn的表達。Transwell小室中驗證TgAb IgG和總IgG可由基底測向頂端側轉運，該種轉運為pH依賴性、且為單向轉運。 結論：FcRn可介導甲狀腺細胞內IgG型TgAb的轉運和代謝，並且FcRn的轉運功能和IgG種類無關。FcRn可能通過介導IgG的轉運參與了HT的發病機制。
