《新型重組毒素uPAa-melittin對卵巢癌靶向治療的實驗研究》是依託吉林大學，由崔滿華擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：新型重組毒素uPAa-melittin對卵巢癌靶向治療的實驗研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：崔滿華
- 依託單位：吉林大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
卵巢癌是婦科惡性腫瘤中死亡率最高的疾病，本項目就是以uPA/ uPAR 系統做為抗卵巢癌藥物作用的一個新靶點,利用uPA的結構特點，以A鏈與卵巢癌細胞表面的受體結合,以小分子毒素melittin替代B鏈為靶向藥物，靶向定位殺傷卵巢癌細胞，實現了特異性靶點、高效結合、靶向殺傷，而對正常組織無毒或低毒性的治療目的。本項目利用基因工程技術、發酵技術以及蛋白純化技術，獲得高產量、高純度、高活性的uPAa-melittin新型重組毒素。通過其對卵巢癌細胞株及卵巢癌動物模型的一系列研究來觀察uPAa-melittin對卵巢癌的治療作用並探討其作用機制。本項目的意義就在於以uPA/ uPAR 系統為一個新的平台，探索一個新的治療卵巢癌藥物的靶點，構建具有一靶雙效的新型重組毒素。為卵巢癌的治療開闢一個全新的設計思路與途徑。
結題摘要
卵巢癌是死亡率最高的婦科惡性腫瘤，70％以上的卵巢癌患者就診時病變已屬於晚期。針對卵巢癌的靶向治療，能夠高效並靶向性地殺傷卵巢癌細胞，是一種治療卵巢癌有效的新途徑。項目組研究發現在卵巢癌患者的原發病灶以及轉移病灶內尿激酶型纖溶酶原激活物（uPA）與尿激酶型纖溶酶原激活物受體（uPAR）呈高表達，而在正常組織中無表達或僅有微弱表達。因此我們將uPA/uPAR系統作為卵巢癌治療的新靶點。同時選擇小分子毒素—蜂毒肽（melittin）做為與特異性靶點結合的靶向藥物。項目組利用基因工程技術、大規模發酵技術以及蛋白純化技術，獲得高產量、高純度、高活性的新型重組毒素uPAa-melittin，經過80升發酵罐的大規模發酵、純化後目的蛋白產量為330mg/L，利用卵巢癌細胞株及動物模型、CCK-8、流式細胞儀、免疫組織化學染色、RT-PCR、Western blot等實驗方法和技術，進行了靶向殺傷作用的研究，實現了特異性靶點、高效結合、定向殺傷卵巢癌細胞，而對正常組織無毒或低毒性的治療目的，同時進一步研究了uPAa-melittin抗卵巢癌侵襲轉移的作用，並對uPAa-melittin抗卵巢癌的作用機制進行了探討研究，結果表明uPAa-melittin對卵巢癌細胞的轉移性生長具有明顯的抑制作用，其作用機制通可能是過誘導卵巢癌細胞SKOV3的凋亡實現的。而誘導凋亡的機制可能是與線粒體凋亡路徑的調控有關。本項目以uPA/uPAR系統做為一個新的平台，探索一個新的治療卵巢癌的藥物作用靶點，構建具有新型重組毒素uPAa-melittin，並驗證了其對卵巢癌的靶向治療作用，這是本項目組的自主創新設計，為研究卵巢治療的新型靶向藥物提供了一個新途徑。
