斯式弓形菌:發現史,弓形桿菌屬的命名,A. skirrowii的發現,生物學特性,

Arcobacter skirrowii（以下簡稱A. skirrowii），中文名稱為“斯氏弓形菌”（詞條名有誤），是一種新型革蘭氏陰性致病菌。其屬名Arcobacter拉丁語意為“弓”，希臘語意為“棒”，可理解為“弓形棒”或“彎曲棒”。它描述了該屬大多數細菌所具有的彎曲形狀。

其研究主要集中於人與動物的感染與防治，致病機理仍較為模糊。

基本介紹

中文學名：斯式弓形菌
拉丁學名：Arcobacter skirrowii
別稱：A. skirrowii
二名法：Arcobacter skirrowii Vandamme et al. 1992
界：細菌界
門：變形菌門（Proteobacteria）
綱：ε-變形菌綱(Epsilonproteobacteria)
目：彎曲菌目（Campylobacterales）
科：彎曲菌科（Campylobacteraceae）
屬：弓形桿菌屬（Arcobacter）
種：斯氏弓形菌種（Arcobacter skirrowii）
分布區域：人與動物體內

發現史,弓形桿菌屬的命名,A. skirrowii的發現,生物學特性,形態與生活環境,生化特性,鑑定方法,分離培養,致病性,防治方法,

發現史

弓形桿菌屬的命名

弓形桿菌屬現已知12個種，它們分布廣泛與自然界，致病力與彎曲菌相當。

它們曾被歸類為彎曲桿菌屬，但由於它在需氧、微需氧和15℃低溫條件下均可生長，1992年單獨列出為弓形菌屬。

Peter Vandamme等人於1992年描述了A. skirrowii，並於2000年發布了檢測其存在的PCR分析法。

A. skirrowii的發現

人們曾在腹瀉的羔羊、流產的豬羊、牛的胎兒以及公牛的陽莖外鞘中發現A. skirrowii。

2004年，Wybo, I. Breynaert. J.等人從一位73歲的腹瀉病人糞便樣品中分離出A. skirrowii，這是人們首次在人體內發現它。該病例中A.skirrowii來源尚不明確，與食品攝入及寵物接觸沒有明顯關係，尚不清楚該菌株是否與病人的腹瀉病因相關。

生物學特性

形態與生活環境

A.skirrowii菌體大小為(0.2-9.9)×(0.5~3)μm，革蘭氏陰性，無芽孢，無莢膜，為彎曲短桿菌，其外膜主要由脂多糖組成。通常呈S形或螺旋形，老培養物中可出現球形、近似球形或疏鬆螺旋的絲狀體，可長達 20 μm。一端或兩端具有單鞭毛，運動活潑，可做“投標狀”運動。

能夠在正常氧氣濃度和厭氧環境下生長，但最適生長條件為微氧(3～10% O₂)，不需要H₂。最適生長溫度為25～30℃，在 37℃和 42℃生長不定，4℃條件下不能生長。

它們廣泛的存活於家禽、反芻動物和野生鳥類體內，排泄在糞便中。寵物也可以是無症狀攜帶者。這些寄主都可能成為食物或水污染的來源，因此A. skirrowii對人體健康可構成風險。

生化特性

A.skirrowii生化反應不活潑。乙醯甲基甲醇(v-P)試驗和甲基紅(MR)試驗陰性，不發酵且不氧化糖類，能利用有機酸與胺基酸作為碳源，大多數菌株在0.032%甲基橙存在下可生長，可被0.1%氯化三苯基四氮唑(TTC)抑制，在1%牛膽汁，l%甘氨酸，1.5%(或3.5%)氯化鈉及 8%葡萄糖中生長不定。

具有氧化酶和觸酶活力，多數菌株具有過氧化氫酶活性，無脲酶活力。可還原硝酸鹽為亞硝酸鹽。吡嗪醯胺水解陰性。不水解明膠、酪蛋白、澱粉、馬尿酸和酪氨酸，不產生吲哚和色素。在三糖鐵(TSI)瓊脂中不產生 H₂S，在半胱氨酸產 H₂S情況不定。

四種常見Arcobacter 主要特徵差異表

項目	A. nitrofigilis	A. butzleri	A. cryaerophilus	*A. skirrowii*
尿素酶	﹢	﹣	﹣	﹣
α-溶血	﹣	F	﹣	﹢
4%氯化鈉	﹢	﹣	﹣	﹢
頭孢哌酮（64mg/L）	﹣	﹢	﹢	﹢
在基本培養基的生長	﹣	﹢	﹣	﹣
在麥康凱瓊脂的生長	﹣	﹢	﹣	﹣

註：+，95-100%菌株呈陽性；—，0-11%菌株呈陽性；F，14-50%菌株呈陽性。

鑑定方法

傳統分離鑑定方法存在步驟複雜和檢測周期長等諸多不足。近年來，隨著分子生物學技術的不斷發展，越來越多快速、特異性檢測A. skirrowii的方法應運而生。

聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction，PCR)
以16S r RNA和23S r RNA為靶基因的多重PCR方法已經成功套用於多種Arcobacter的同時檢測。可同時鑑定A．butzleri、A．cryaerophilu1A、A．cryaerophilus 1B和 A．skirrorwii。該測定法用於在兩種富集培養基中快速檢測和鑑定弓形桿菌物種。從接種培養液的瓊脂平板上提取分離物，隨後使用m-PCR來鑑定。
全細胞蛋白的SDS一聚丙烯醯胺凝膠電泳(SDS—polyacrylamide gel electrophoresis，SDS—PAGE)方法
成功鑑別法國生物梅里埃彎曲桿菌鑑定系統所不能區別的A．butzerli（布氏弓形菌）和A. skirrowii（斯式弓形菌）。
核糖體分型
為鑑定Arcobacter的重要技術手段，但在實驗室推廣套用受到兩個因素制約：實驗步驟需要根據樣本情況進行細緻最佳化；分型操作涉及危險化學品或放射性同位素。
至2013年已開發了採用胍抽提 DNA法和與非放射性地高辛標記探針雜交的核糖體分型方法。使用 Pvul I或C I消化基因組 DNA 的 16S r RNA 探針雜交可以鑑別Campylobacter、Helicobacter和 Arcobacter 3個屬，或是 Arcobacter屬內的不同種。
目前報導的 Arcobacter分子分型方法還有：擴增片段長度多態性(amplified fragment length polymorphism，AFLP)、PCR_限制性片段長度多態性 (PCR-restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP)、隨機擴增多態性 DNA (random amplified polymorphic DNA，RAPD)、腸桿菌基因間重複共有序列一PCR (enterobacterial repetitive intergenic consensus—PCIL,ERIC PCR)和脈衝場凝膠電泳(pulsed field gel electrophoresis，PFGE)等。

分離培養

A. skirrorwii營養要求相對較高，分離時，通常需在選擇性培養基中加入血液或血清，同時加入多種抗生素，將溫度控制在24~30℃，以抑制腸道正常菌群，提高分離方法的選擇性。

參考培養基：加入5%馬血的Mueller Hinton培養基，並在微氧條件下抽出80%空氣，在30℃溫育48小時，並引入8%CO₂，8%H₂和 84%的N₂進入罐子。

現已建立了多種不同的增菌、選擇性平板和纖維素膜過濾的方法，主要歸結為兩大類：一步法和兩步法 。

一步法是指直接使用選擇性培養基進行分離培養，這類培養基主要有CIN (cefsulodin irgasan novobiocin) 瓊脂、CAT (Cefoperazone amphotericin teicoplanin)瓊脂、Skirrow瓊脂、Butzler培養基、Campy-BAP培養基和m CCD (modified charcoal cefoperazone deoxycholate)瓊脂等。

兩步法是指先使用液體增菌培養基進行富集培養，然後再利用固體選擇性培養基或纖維素膜的方法進行分離培養。用於增菌的液體培養基主要有AB (Arcobacter broth)、ASB(Arcobacter selective broth) 、AEB (Arcobacter enrichment broth)和CAT broth等。

研究表明，與一步法相比，採用兩步法可以提高A．skirrorwii的分離率。此外，雖然A．skirrorwii在m CCDA和CAT培養基上均可生長，但與m CCDA相比，CAT可以更好地支持Arcobacter屬中更多種的生長。

致病性

A.skirrowii是一種人畜共患的食源性和水源性病原菌，與人類胃腸炎和菌血症有關，可危及老年人生命。與畜類的胃腸炎和流產有關。其感染的途徑可能包括：人對人(宿主對宿主)的直接接觸、食入被污染的飲用水或食物（其中家禽產品的污染率極高），未經殺菌處理的奶類製品等等。

A.skirrowii引起胃腸炎的臨床症狀與彎曲桿菌（Campylobacter）病類似，主要表現為持續性腹瀉，伴有腹痛、胃痙攣、噁心嘔吐和發熱等症狀，但引起腹瀉的頻率和持久性更高。其感染率目前也難以評估。

國內尚未發現 A.skirrowii致病機理和潛在毒力因子相關報導，國外此方面報導也很少，實驗研究主要集中在兩方面：①對 Vero和 CHO細胞的細胞興奮型腸毒素、細胞毒素型腸毒素和細胞致死性分析研究；②對 He La和 Intestine 407細胞的粘附、定植能力測試。

防治方法

從生物學角度，檸檬酸和乳酸可以抑制D6的生長繁殖，乳酸鏈球菌素(500 iu/ml)可殺死約 50%A.skirrowii。磷酸三鈉和乙二胺四乙酸(EDTA)(單獨或與乳酸鏈球菌素結合)作為一種短期控制手段，對殺滅A.skirrowii純培養物具有一定效果。

而預防控制 A.skirrowii引發的人類疾病，建議從減少食物鏈中A.skirrowii入手。

為了減少人畜共患病對消費者健康的潛在風險，建議在肉類生產過程中保證屠宰衛生，避免各種污染源對屠體的污染；在日常生產加工中，應依據 HACCP原則，建立“過程控制”和定期微生物監測系統，加強對動物性食品加工過程中重點環節的監督管理；加大監測力度，及時掌握食品的動態衛生質量。

以預防為主，建議加強、食品生產經營單位以及從業人員的衛生知識的培訓，推行持證上崗制度；加工從業人員應注意個人衛生，完善並執行衛生管理制度；加強食品衛生知識宣傳，提高民眾的衛生安全意識；實施良好生產規範守則等。

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