《整合素連線激酶（ILK）促進膠質瘤侵襲生長的分子機制》是依託中山大學，由張恆擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：整合素連線激酶(ILK)促進膠質瘤侵襲生長的分子機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張恆
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
本課題組既往研究表明整合素連線激酶(ILK)在膠質瘤中表達升高並與預後顯著性負相關。在此基礎上，建立ILK穩定高表達和表達持續下調的膠質瘤細胞系，通過劃痕實驗、transwell及Matrigel三維立體培養分析ILK對膠質瘤侵襲生長的影響，進一步通過體外和體內實驗探討ILK影響膠質瘤侵襲性的分子機制。採用RT-PCR、免疫印跡法、凝膠酶譜法、免疫組化法明確ILK可調控與腫瘤侵襲密切相關的NF-κB靶基因轉錄和表達後，通過體內外實驗，採用脂質體瞬時共轉染、雙螢光素酶報告基因測試系統、免疫印跡和免疫螢光染色等方法研究ILK能否激活IKK/IκB/NF-κB信號傳導通路從而調控與腫瘤侵襲密切相關的NF-κB靶基因；進一步論證ILK激活NF-κB信號通路是否通過AKT介導。希冀深入揭示ILK在膠質瘤侵襲生長的惡性生物學行為中所起的作用及其機制,為ILK成為膠質瘤治療靶點的可行性提供理論依據。
結題摘要
本課題組既往研究表明整合素連線激酶(ILK)在膠質瘤中表達升高並與預後顯著性負相關，但ILK在膠質瘤惡性生長的生物學行為中所起的作用及其機制尚不明確。針對此關鍵問題，本課題從三個方面展開研究：（1）明確ILK表達上調促進人膠質瘤細胞侵襲，而且尋找到其上游調控分子microRNA-X（尚未發表，不宜公開），microRNA-X在膠質瘤組織中表達降低，對ILK直接靶向調控的能力下降，AKT信號傳導通路激活，進而導致膠質瘤細胞侵襲能力顯著增強。（2）本研究中免疫組化結果膠質瘤中ILK蛋白過度表達與NF-κB蛋白激活呈顯著性相關，提示ILK參與激活轉錄因子NF-κB，但其中間調控機制尚不清楚。深入研究發現IKK家族重要成員IKBKE在膠質瘤中過度表達，並且可通過激活IKK/IκB/NF-κB信號通路顯著增強膠質瘤細胞的抗凋亡能力。（3）本課題組在膠質瘤細胞中過表達ILK後，通過microRNA晶片分析發現microRNA-Y下降顯著（尚未發表，不宜公開），實驗結果表明膠質瘤細胞中ILK可能的下游調控因子microRNA-Y表達下調後，對IKBKE直接靶向調控的能力下降，激活轉錄因子NF-κB，膠質瘤細胞抗凋亡能力顯著增強。總之，本項目較系統地闡明了ILK 在膠質瘤惡性生長的生物學行為及上下游信號調控的分子機制,為ILK 成為膠質瘤治療靶點的可行性提供重要的理論依據。
