《攜帶blaCTX-M-15的IncFII相關質粒多重耐藥區分析及適應度代價研究》是依託四川大學，由宗志勇擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：攜帶blaCTX-M-15的IncFII相關質粒多重耐藥區分析及適應度代價研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：宗志勇
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
blaCTX-M-15是全球分布最廣的超廣譜β內醯胺酶基因，介導對青黴素類和頭孢菌素類抗生素耐藥，且常見於社區獲得性感染病原菌，是重大的臨床難題和公共衛生挑戰。對其播散機制研究將為控制其播散提供理論支持。blaCTX-M-15主要由多種IncFII相關質粒攜帶，但其在質粒間的移動機制和IncFII相關質粒對宿主菌株產生的適應度代價不明，嚴重製約了對其廣泛播散的理解。.在大量的前期試驗基礎上，本項目將（1）採用PCR mapping、DNA步移法和鳥槍克隆等方法研究攜帶blaCTX-M-15的IncFII相關質粒的耐藥區，揭示blaCTX-M-15的遺傳環境和分子移動機制；（2）採用競爭試驗結合多種數學模型研究這些質粒對宿主菌株的短期和長期適應度代價，並將研究質粒在長期傳代產生的進化對適應度的影響。.所獲資料將揭示blaCTX-M-15分子移動機制和IncFII相關質粒的適應性。
結題摘要
blaCTX-M-15是全球分布最廣的超廣譜β內醯胺酶基因，介導對青黴素類和頭孢菌素抗生素耐藥，且常見於社區感染病原菌，是重大的臨床難題和公共衛生挑戰。對其播散機制研究將為控制其播散提供理論支持。本研究通過採用PCR映射、逆向PCR和鳥槍克隆等方法揭示了攜帶blaCTX-M-15 IncFII相關質粒（簡稱為FIIA質粒）的多重耐藥區，發現blaCTX-M-15位於複雜的基因環境中，與其他耐藥基因由多種移動基因元件“鑲嵌”呈馬賽克樣結構。blaCTX-M-15有著多種移動機制，其中插入序列IS26通過插入/重組和形成複合型轉座子以及質粒間的重組可能是其主要移動機制。 本研究建立了針對FIIA質粒的多位點序列分型體系。介導blaCTX-M-15傳播的FIIA質粒分屬多種類型，類似於經典FII質粒R100或R1，或者類似於含毒力基因的pRSB107、pIP1206或pWCE35，或者為多種質粒的雜合體。blaCTX-M-15的播散由數種FIIA質粒介導。 本研究通過競爭實驗進行了攜帶blaCTX-M-15 FIIA質粒的適應度代價研究。FIIA質粒在短期和長期內未對宿主菌株帶來顯著的適應度代價。與僅攜帶RepFIIA的質粒相比，攜帶多複製子的質粒pJIE101和pD57也並未為宿主菌株帶來更顯著的適應度代價。適應度代價小有助於解釋FIIA質粒成為介導blaCTX-M-15播散主要載體。 選取了1株攜帶blaCTX-M-15ST131代表菌株進行了全基因組測序。發現該菌含兩個FIIA質粒（pJIE186和p186-2）。其中pJIE186為接合性質粒，含有RepFIIA，並攜帶多種耐藥基因；p186-2為非接合性質粒，含有RepFIB和RepFIIA，無耐藥基因，卻攜帶許多毒力基因。這兩個質粒分別介導耐藥和毒力，可能對blaCTX-M-15播散起了重要作用。 總之，通過本項目及文獻發現blaCTX-M-15的廣泛播散是多種機制共同作用，包括（1）blaCTX-M-15位於複雜的多重耐藥區，這些耐藥區中含有多種可供同源性重組的區域以及多種移動元件，可形成多種機制移動blaCTX-M-15；（2）多種FIIA質粒參與了blaCTX-M-15的移動，而FIIA質粒在腸桿菌中具有良好的適應性。阻斷質粒在菌株間的水平傳播將是控制blaCTX-M-15進一步播散的主要方向。
