擬穴青蟹促性腺激素釋放激素(GnRH)的結構與功能研究

《擬穴青蟹促性腺激素釋放激素(GnRH)的結構與功能研究》是依託廈門大學，由葉海輝擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：擬穴青蟹促性腺激素釋放激素(GnRH)的結構與功能研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：葉海輝
• 依託單位：廈門大學

項目摘要

促性腺激素釋放激素（GnRH）對脊椎動物生殖具有重要的調控作用，迄今有關無脊椎動物GnRH的了解甚少。本項目綜合套用生物化學、生理學和分子生物學技術，對海洋經濟蟹類- - 擬穴青蟹(Scylla paramamosain)GnRH結構與功能進行研究。主要內容包括：GnRH化學結構分析；GnRH生物活性鑑定；GnRH生殖作用分析；GnRH基因克隆與表達。本項目旨在查明擬穴青蟹GnRH肽的一級化學結構和基因結構，並闡明擬穴青蟹GnRH的生殖作用及調控方式。本項目率先開展了甲殼動物GnRH肽化學結構和基因結構的研究，對於理解動物界GnRH肽的分子演變具有重要意義；本項目擬結合個體、器官和分子水平開展擬穴青蟹GnRH生殖作用的研究，探討生殖調控軸的存在與否，深化了甲殼動物內分泌學的研究；有關GnRH生殖調控機制的闡明，對青蟹增養殖技術的開發具有一定的指導意義。

結題摘要

擬穴青蟹是我國重要海水經濟蟹類，本項目套用多種研究手段，對促性腺激素釋放激素（GnRH）的結構與功能開展了研究，主要成果總結如下：（1）套用5種GnRH抗體，經免疫組化檢測發現擬穴青蟹神經系統及性腺所含的GnRH類型不同，提示二者可能存在各自獨立的GnRH系統。（2）套用免疫斑點雜交和質譜技術，分離獲得青蟹GnRH，為12個胺基酸組成的小分子神經肽。（3）體外培養實驗表明，GnRH能夠直接促進青蟹卵巢組織Vg mRNA表達,也可以通過神經器官調控卵巢Vg mRNA的表達。（4）經膜片鉗技術檢測，GnRH能夠促進神經細胞L型鈣離子電流的內流，從而調控神經細胞的內分泌活動。（5）轉錄組測序結果進一步表明，青蟹腦神經節存在GnRH信號通路相關基因，例如GnRHR、PKC、JNK、EGFR，目前已經驗證了上述基因並獲得部分cDNA全長。本項目研究表明，擬穴青蟹存在GnRH生殖調控作用，並且GnRH可能以神經內分泌和旁分泌兩種方式共同調控卵巢發育。該結果對於深入理解甲殼類生殖內分泌和開發養殖技術具有重要意義。