《抗SYT-SSX1單克隆抗體的製備及功能與機制的研究》是依託北京大學，由任婷婷擔任負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：抗SYT-SSX1單克隆抗體的製備及功能與機制的研究
- 項目負責人：任婷婷
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
95%以上的滑膜肉瘤具有特異性的染色體異位，形成融合基因SYT-SSX。由於缺乏特異性的抗體，SYT-SSX的檢測主要依賴於RT-PCR和FISH技術，同時也限制了基礎研究的進展。目前國際上研究主要集中於回顧分析SYT-SSX表達與滑膜肉瘤病人預後的關係，而對於SYT-SSX的功能及機制研究甚少。我室前期通過RNA干擾技術揭示了融合基因SYT-SSX的部分功能，在此基礎上，本研究擬通過經典的融合技術，製備出特異的抗SYT-SSX的單克隆抗體，並利用這特異性的抗體，圍繞SYT-SSX表達水平對滑膜肉瘤細胞生物學相關行為的影響，SYT-SSX表達與滑膜肉瘤病人預後，轉移和化療耐藥性的關係，SYT-SSX在腫瘤發生髮展中的作用及分子機制開展系統的研究。通過特異性單抗的製備和後續功能機制的研究，這對闡明SYT-SSX1的功能，並在此基礎上開發新的抗腫瘤靶標藥物，均具有重要理論意義和潛在的套用價值
結題摘要
滑膜肉瘤是一種惡性軟組織肉瘤，主要侵及四肢，可發生於各個年齡段但好發於青少年，其約占全部軟組織腫瘤的10%，1/4以上的患者在診斷後五年內死亡。95%以上的滑膜肉瘤具有特異性的t(X;18) (p11.2;q11.2)染色體異位。即18號染色體上的SYT基因與X染色體上的SSX（SSX1, SSX2, SSX4 ）發生融合。由於該融合基因在滑膜肉瘤出現的高頻性和特異性，使用逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）或螢光原位雜交技術（Fish）來檢測融合基因的表達已經成為滑膜肉瘤診斷的金標準。雖然SYT-SSX融合基因的功能並不明確，但其可在滑膜肉瘤腫瘤形成及發展中起到重要作用。套用siRNA干擾融合基因表達後，腫瘤細胞的侵襲及遷移能力明顯降低。融合基因類型與患者臨床病理特徵及預後之間的關係有很多報導但還不明確。蒐集我院治療的92例具有完整病例資料患者的手術標本。套用RT-PCR檢測融合基因的表達情況，單因素及多因素生存分析患者生存預後與各種臨床病例因子之間的關係。融合基因的比例大約為1：1，單向性滑膜肉瘤多具有SYT-SSX2融合基因，而雙向性滑膜肉瘤多表達SYT-SSX1融合基因；且SYT-SSX2陽性患者的腫瘤體積明顯小於SYT-SSX1陽性患者的腫瘤體積。單因素及多因素生存分析發現表達SYT-SSX2、FNCLCC2級及UICC 1或2期的病人預後較好。將SYT-SSX1及SYT-SSX2轉染入HEK293T 及NIH3T3細胞系內，觀察融合基因對細胞侵襲及遷移能力的影響。 SYT-SSX1陽性細胞較SYT-SSX2陽性細胞有更高的侵襲及遷移能力。我們在前期實驗中發現當3T3細胞、293T細胞轉染融合基因SYT-SSX1及SYT-SSX2後，引起細胞增殖、侵襲及遷移能力的變化。文獻中報導3T3細胞轉染融合基因SYT-SSX1後可表現為滑膜肉瘤細胞系的特徵，因此我們套用Affymetrix microRNA 3.0 Array晶片對3T3-GFP,3T3-SYT-SSX1,3T3-SYT-SSX2細胞進行晶片分析，以期望得到與滑膜肉瘤腫瘤產生及影響其預後的microRNA。
