《抗體製備與使用實驗指南》是科學出版社於2010年出版的圖書,作者是G.C.霍華德(Howard.G.C.)。
基本介紹
內容簡介,作者簡介,圖書目錄,
內容簡介
《抗體製備與使用實驗指南》收集了抗體製備與使用中的基本實驗方法及相關的最新科研進展,這些方法是開展抗體製備研究的必備知識,包括鼠源性單克隆抗體的製備、純化、套用以及抗體的修飾等,同時也包括部分基因重組性單克隆抗體,涉及內容具體、全面,反映了國際上的最新發展方向。
《抗體製備與使用實驗指南》對從事生物學、免疫學、生物化學與分子生物學、醫藥衛生科學領域的科研技術人員,以及高等院校師生具有參考價值。
作者簡介
作者:(美國)G.C.霍華德(Howard.G.C.) (美國)M.R.凱瑟(Kaser.M.R.) 譯者:張權庚 張玉祥 丁衛 等
圖書目錄
譯者序
前言
第1章 抗體
1.1 一種多功能分子——抗體
1.2 相關倫理思考
1.3 實驗室安全
1.4 手冊編排
參考文獻
第2章 抗原
2.1 抗原的選擇
2.2 多肽抗原
2.2.1 多肽抗原的免疫進度表
2.3 蛋白質抗原
2.3.1 原核蛋白
2.3.2 真核蛋白
2.4 全細胞免疫原
2.4.1 全細胞免疫原的免疫方案
2.5 基因免疫
2.5.1 質粒DNA
2.5.2 腺病毒
參考文獻
第3章 佐劑
3.1 引言
3.2 佐劑的使用
3.2.1 總體要求
3.2.2 弗氏佐劑的使用
3.2.3 TiterMax佐劑的使用方案
3.2.4 Ribi佐劑系統(RAS)的套用
3.2.5 Gerbu佐劑的套用
3.2.6 Imject鋁鹽佐劑的使用
參考文獻
第4章 多克隆抗體製備
4.1 概要
4.2 抗原提呈細胞
4.2.1 B細胞的抗原識別
4.2.2 T細胞的抗原識別
4.2.3 B細胞受體和抗體產生
4.2.4 免疫記憶
4.2.5 抗體
4.2.6 佐劑的作用
4.2.7 抗原特點
4.2.8 免疫途徑
4.2.9 免疫步驟
4.2.10 物種選擇
4.3 結論
參考文獻
第5章 單克隆抗體的製備
5.1 引言
5.2 材料
5.2.1 免疫原
5.2.2 免疫用的動物
5.2.3 免疫策略
5.3 免疫程式
5.3.1 培養基和骨髓瘤細胞
5.3.2 免疫B細胞的製備
5.3.3 融合和鋪板
5.3.4 篩選
5.3.5 亞克隆和低溫凍存
5.3.6 雜交瘤細胞的擴增
5.4 結論
參考文獻
第6章 單克隆抗體的定量生產
6.1 引言:方法比較
6.2 抗體製備方法概況
6.2.1 產量
6.2.2 費用和設備
6.2.3 動物福利
6.2.4 免疫活性分子污染
6.2.5 微生物污染
6.2.6 抗體糖基化
6.3 腹水的製備
6.3.1 方法概述
6.3.2 免疫原同種異體反應性或異種抗原反應性的對策
6.3.3 體內製備方案:BALB/c小鼠腹水
6.3.4 體內單克隆抗體的製備:通過異種的雜交瘤細胞系製備腹水
6.4 細胞培養製備單克隆抗體
6.4.1 在研究實驗室中體外製備單克隆抗體
6.4.2 實驗方案:在CELLineCL-1000培養瓶中製備單克隆抗體
6.4.3 用重組和轉基因系統製備抗體
6.5 結論
參考文獻
第7章 抗體的純化和鑑定
7.1 引言
7.2 抗體純化
7.2.1 通過沉澱進行部分純化
7.2.2 蛋白質A和蛋白質G
7.2.3 IgM和FAB抗體片段的純化
7.3 抗體的鑑定
7.3.1 區帶(醋酸纖維)電泳
7.3.2 通過280nm吸光度測定抗體濃度
7.3.3 SDS-PAGE
7.3.4 免疫印跡
7.3.5 等電聚焦
7.3.6 酶免疫分析
7.4 結語
參考文獻
第8章 細菌中製備抗體
8.1 引言
8.2 所需材料
8.3 方法
8.3.1 噬粒設計
8.3.2 文庫構建
8.3.3 抗原特異性抗體的篩選
參考文獻
第9章 抗體的化學和蛋白水解修飾
9.1 引言
9.2 一般步驟
9.2.1 抗體溶液的穩定性
9.2.2 抗體的定量
9.2.3 抗體的濃縮和緩衝液置換
9.3 胺類的修飾
9.3.1 總體考慮
9.3.2 胺反應試劑的分類
9.3.3 NHS-PEO4-BIOTIN的生物素化反應
9.3.4 用螢光染料進行標記
9.3.5 巰基的導入
9.3.6 聚乙二醇化
9.3.7 與螯合劑的偶合
9.4 巰基和二硫鍵的修飾
9.4.1 IgG的二硫鍵和巰基
9.4.2 二硫化物的互換反應
9.4.3 其他涉及巰基和二硫鍵的氧化-還原試劑
9.4.4 用鹵代烴和N-烷基馬來醯亞胺進行硫醇的烷基化
9.5 碳水化合物修飾
9.5.1 範例流程10:用NaIO4氧化IgG的碳水化合物部分
9.5.2 範例流程11:DAVLB醯肼與氧化型IgG的偶合
9.6 抗體的固相化
9.6.1 聚苯乙烯培養皿和ELISA孔的固相化
9.6.2 與親和介質的共價偶合
9.6.3 經生物素介導與親和介質的固相化
9.7 蛋白的水解修飾
9.7.1 木瓜蛋白酶水解兔IgG製備Fab片段
9.8 抗體與其他蛋白質的交聯
9.8.1 範例流程18:肼與IgG氨基的交聯
9.8.2 範例流程19:醛與另一個蛋白質氨基的交聯
9.8.3 範例流程20:MEHN-IgG與FB-蛋白質的交聯
參考文獻
第10章 抗體的套用
10.1 引言
10.2 蛋白質轉印
10.2.1 轉印設備
10.2.2 轉印緩衝液
10.2.3 條件的最佳化
10.2.4 轉印膜
10.3 檢測
10.3.1 蛋白質印跡的直接染色
10.3.2 抗原的檢測
10.3.3 蛋白質免疫印跡的檢測抗體
10.3.4 免疫印跡實驗中抗體的替代品
10.3.5 蛋白質免疫印跡的定量
10.3.6 相對分子質量標準品
……
第11章 免疫組織化學法
第12章 免疫電子顯微鏡
第13章 流式細胞術
第14章 酶聯免疫吸附試驗
第15章 抗體的未來:挑戰與機遇
索引
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