《抗腔道腫瘤人內皮抑素小環DNA洗脫支架的研究》是依託上海交通大學，由郭聖榮擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：抗腔道腫瘤人內皮抑素小環DNA洗脫支架的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：郭聖榮
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腔道腫瘤已成為危害人類健康的主要殺手。目前臨床上支架植入為姑息性治療，而全身放化療毒副作用大。將基因藥物與支架結合，可物理改善腔道狹窄並實現腔道腫瘤局部基因治療。本項目將人內皮抑素小環DNA包載於生物降解性高分子材料中製備載藥的生物可吸收支架，實現既改善腔道物理通暢性又單方向緩慢釋放基因藥物到支架植入部位的腫瘤組織，不向支架的內腔釋藥，起到局部治療腫瘤、降低毒副作用、防止再狹窄的作用。研究內容包括：（1）人內皮抑素小環DNA、人內皮抑素-綠色螢光蛋白小環DNA的構建；（2）人內皮抑素小環DNA與聚陽離子化合物的基因複合物製備與評價；（3）荷載基因複合物生物可降解支架的相關研究。該支架具有生物可吸收性，植入體內後可避免二次手術取出。本項目將醫療器械與基因治療結合，為腔道腫瘤的介入治療、基因治療、醫療器械領域提供新思路、新方法、新知識，為開發新一代抗腔道腫瘤支架產品提供科學依據和打下物質基礎。
結題摘要
非血管腔道腫瘤，如食道癌等已成為危害人類健康的主要殺手。目前臨床上支架植入為姑息性治療。將基因藥物與支架結合，可物理改善腔道狹窄的同時並實現腔道腫瘤局部基因治療。內皮細胞抑制素是目前公認最強的血管生成抑制因子，特異性抑制血管內皮細胞的生長，無毒副作用。小環DNA載體僅由外源基因的表達盒構成，不含有來自細菌質粒的骨架結構，在生物安全性、轉染效率、生物活性方面都優於傳統質粒載體。本項目構建和製備人內皮抑素小環DNA；設計、製備和研究多種非病毒基因載體；製成基因複合物包載於生物降解性高分子材料中製備載基因的支架，並進行表征和評價。取得了如下研究成果：1.成功構建和製備人內皮抑素小環DNA、人內皮抑素-綠色螢光蛋白小環DNA （PMC-ENDO-GFP），包括構建人內皮抑素小環DNA、PMC-ENDO-GFP並轉化至ZY大腸桿菌中，質粒DNA提取與驗證，PMC-ENDO-GFP測序，小環DNA的提取與純化等。內皮抑素小環DNA抽提後進行電泳實驗可以看到泳道上僅有小環DNA條帶，製備成功。2. 製備和評價了多種新型聚陽離子基因載體，包括GNR-PEI, GNR-DSPEI-PEG-RGD，殼聚糖季膦鹽等。如GNR-DSPEI-PEG-RGD可同時負載基因和化療藥物，具有腫瘤靶向性以及細胞內回響性藥物釋放特性，具有優異的抗腫瘤生長和轉移效應；通過靜電作用，構建和表征和評價了多種基因複合物，如將人內皮抑素小環DNA與PEI或GNR-PEI等製成複合物。內皮抑素小環DNA與PEI形成的複合物在293T細胞中有良好的轉染效果，在MCF-7、MCF-7/ADR、Eca-109細胞中也可轉染。3. 研製了多種生物降解性支架膜材，如將PVP添加到PCL中製成的支架膜可調控藥物的釋放行為；將藥物以生物可降解性PLGA為膜材，分別負載基因或基因複合物製成載基因的PLGA膜，並評價載基因膜的基因釋放行為、安全性、穩定性和基因轉染作用。基因或基因複合物從PLGA膜中緩釋並對Eca-109人食管癌細胞具有較好的轉染效果。該膜材可包覆於鎳鈦記憶合金食道支架上製備抗腫瘤基因洗脫支架。4. 建立了食管癌兔模型以及評價載藥支架植入動物食管中的安全性和有效性平台，載藥支架植入豬食管中不僅未發現系統毒性和植入部位的局部毒性，而且可有效抑制食管組織增生、炎性等。本項目在人內皮抑素小環DNA製備、新型非病毒基因載體
