《抑制變形鏈球菌Sortase A酶預防齲病的套用基礎研究》是依託華中科技大學，由胡萍擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：抑制變形鏈球菌Sortase A酶預防齲病的套用基礎研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：胡萍
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
變形鏈球菌是人類齲病的主要致病菌，細胞膜內的sortase A酶催化具有sorting信號的表面蛋白連線到細胞壁上。變形鏈球菌表面蛋白Pac、GbpC不僅是具有sorting信號的表面蛋白，還是粘附毒力因子，它們幫助變形鏈球菌附著在牙面,形成制齲性菌斑。本研究在提純了變形鏈球菌Sortase A酶，並構建螢光分光光度計檢測Sortase A酶活力的反應體系的基礎上，篩選出在MIC值內具有抑制變形鏈球菌Sortase A酶活性的抑制劑,並通過對抑制劑進行衍生物的設計與合成將其最佳化。最佳化後的抑制劑能在不影響變形鏈球菌生長活性的前提下，通過抑制變形鏈球菌sortase A酶而減少其表面粘附毒力因子，從而降低細菌致齲性菌斑的形成，預防齲病的發生。長期使用該抑制劑防齲，變形鏈球菌不會產生耐藥性，為齲病預防提供了新的思路。
結題摘要
變形鏈球菌是人類齲病的主要致病菌，細胞膜內的sortase A酶催化具有sorting信號的表面蛋白連線到細胞壁上。變形鏈球菌表面蛋白Pac不僅是具有sorting信號的表面蛋白，還是粘附毒力因子，他們幫助變形鏈球菌粘附在牙面，形成致齲性菌斑，因此sortase A酶是與變形鏈球菌致齲性生物膜形成密切相關的毒力因子。本研究提純了變形鏈球菌sortase A酶，並構建了螢光光度計檢測sortase A酶活力的反應體系，測出薑黃素和桑色素的IC50值分別10.2±0.7和6.7±1.1。.同時採用肉湯稀釋法測得薑黃素和桑色素對變形鏈球菌的MIC值分別為175µM和575µM。篩選出的薑黃素和桑色素是能在MIC值內抑制變形鏈球菌sortase A酶活性的抑制劑。免疫印跡實驗發現15µM薑黃素和30µM桑色素使變形鏈球菌表面的粘附毒力因子Pac蛋白落入到培養基中，提示薑黃素和桑色素能在不干擾變形鏈球菌生長的前提下，通過抑制sortase A酶而使得變形鏈球菌表面粘附因子蛋白Pac較少。變形鏈球菌細菌表面的粘附毒力因子Pac減少，從而影響到變形鏈球菌的粘附能力。在後續的生物膜形成實驗中15µM薑黃素和30µM桑色素均能有效減少主要致齲菌變形鏈球菌生物膜的形成，為安全有效的防治齲病提供了新的思路和方法。
