《房顫中microRNA變化對SK通道及電重構的影響》是依託上海交通大學，由凌天佑擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：房顫中microRNA變化對SK通道及電重構的影響
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：凌天佑
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
房顫發生過程中，心房肌電重構，使房顫更易發生與維持。電重構與離子通道的表達與功能相關。SK通道是小電導、鈣敏感性鉀通道，其三個家族成員SK1、SK2、SK3都與房顫相關，但其調節機制及對電重構的影響尚不明確。我們前期工作觀察到microRNA（miRNA）調節SK3的表達，本項目擬在此基礎上：（1）通過房顫與非房顫患者心房組織miRNA分布的差異，結合計算機軟體分析，找到與SK通道可能相關的miRNA；（2）在HL-1細胞（來源於小鼠心房的心肌細胞）上，觀察miRNA對SK通道另兩個家族成員SK1、SK2的調節作用；（3）通過在體小鼠注射潛在靶點為SK通道的miRNA拮抗劑（LNA-anti-miR），觀察對心房電生理特性的影響，包括動作電位時程、有效不應期、致心律失常特性等。本研究將有助於進一步闡明房顫發生及維持的分子機制，並可能為房顫的治療策略提供新思路，具有重要的基礎科研價值與現實意義。
結題摘要
房顫是社會醫療體系的沉重負擔，但其機制未明，需要通過對房顫機制的深入了解，進一步探索房顫治療的新方法。 一、糖尿病是房顫的獨立危險因素。但是，糖尿病對於心房電生理的影響仍不明確。我們探索了糖尿病狀態下，SK通道導致的心臟電生理變化。在糖尿病小鼠模型上，我們發現，心房肌SK2和SK3的蛋白表達分別各自下降了85%和92%，而SK1沒有變化。與對照組相比，糖尿病小鼠分離得到的心房肌的SK電流顯著降低，動作電位時程顯著延長。Apamin灌注在對照組可顯著延長動作電位時程，但在糖尿病組動作電位無明顯延長。糖尿病組心房組織、以及高糖培養的HL-1細胞的氧化應激產物顯著增加，而常規糖培養的HL-1細胞暴露於H2O2時，SK2和SK3 的表達降低。高糖狀態下SK2和SK3的酪氨酸硝化顯著增加，導致通道轉變加速。Tiron的套用可以防止相關變化。我們的研究結果提示，糖尿病氧化應激導致糖尿病心房的SK通道相關電重構，並可能促進心律失常的發生。 二、MicroRNA（miRNA）是調節基因表達的一個重要因素，並可能成為未來的治療靶點。L型鈣離子通道是與房顫相關的主要電重構通道。CNCNB2是L型鈣離子通道的重要亞基，也是miR-499的靶點。與無房顫史患者相比，永久性房顫患者的心房組織中，CACNB2顯著下調67%。MiR-499擬似物轉入HL-1細胞，CACNB2蛋白的表達下調，而miR-499抑制物上調了CACNB2的蛋白表達。通過螢光探針確定miR-499與CACNB2的3′非翻譯區的結合。在轉入miR-499擬似物後，通過Argonaute蛋白得到的miRNA介導的沉默複合物中，CNANB2的mRNA增加。此外，CACNB2的下調還導致另一個通道小孔形成亞基CACNA1C的下調。因此，心房miR-499的上調引起CACNB2的下調，並可能參與房顫心房電重構。研究成果有益於對房顫的發生維持機制及未來的診治的進一步探索。 三 、在冷凍球囊消融治療陣發性房顫的臨床套用及安全性研究中，術後6個月隨訪時，86%的患者維持竇性心律；一年隨訪時，76%的患者沒有房顫復發。早期復發與遠期復發率相關。研究結果為該技術的臨床套用提供重要的依據，同時積累了大量患者數據，為下一步基礎及轉化研究的開展構建了良好的基礎。
