基本介紹
- 中文名：愛滋病檢測試劑
- 外文名：Diagnostic kit for Antibody to Human Immunodeficiency Vi rus
- 包裝規格：48人份/盒96人份/盒
- 預期用途：檢測HIV-I/HIV-2抗體
檢驗原理,主要組成成份,儲存條件,適用儀器,樣本要求,檢驗方法,參考值,檢驗結果解釋,方法局限性,產品性能指標,注意事項,
檢驗原理
以人類免疫缺陷病毒基因重組抗原及辣根過氧化物酶標記抗原為主要原料，套用雙抗原夾心酶聯免疫法原理對血清或血漿樣品中所含的待測抗體進行檢測。
主要組成成份
編號 | 組分名稱 | 48人份 | 96人份 |
1 | 包 被 板 | 48孔×1塊 | 96孔×1塊 |
2 | 酶 結 合 物 | 3.2ml×1瓶 | 7.5 ml×1瓶 |
3 | 底 物 液 | 3.2ml×1瓶 | 7.5 ml×1瓶 |
4 | 顯 色 劑 | 3.2ml×1瓶 | 7.5 ml×1瓶 |
5 | 洗 滌 液 | 30ml×1瓶 | 50ml×1瓶 |
6 | 終 止 液 | 3.2ml×1瓶 | 7.5 ml×1瓶 |
7 | 陰 性 對 照 | 1.0ml×1瓶 | |
8 | 陽 性 對 照 | 1.0ml×1瓶 | |
9 | 子 母 袋 | 1個 | |
10 | 說 明 書 | 1份 | |
11 | 板 貼 | 2張 |
註：不同批號試劑盒中各組份不可以互換。
其他需用但試劑盒未提供材料
1．酶標儀
2．恆溫箱或恆溫水浴鍋
3．微量移液器
儲存條件
1．本試劑盒儲存條件2-8℃，有效期一年。未開封試劑盒的各組份在2-8℃貯存可保存至成品有效期。
2．包被條拆封使用後．應將剩餘包被條用不乾膠封膜覆蓋，裝入密封袋中。
3．試劑盒其他組份使用後要及時放回到2-8℃條件。
適用儀器
半自動或全自動微孔板式酶標儀
樣本要求
採集：
血漿：使用抗凝血漿管(枸櫞酸鹽、EDTA鹽、肝素之一為抗凝劑)採集樣品。樣品離心分離後，提取血漿用於檢測。
血清：採用正確醫用技術採集標本。離心分離後，提取血清樣品用於檢測。
儲存：樣品可存放於2-8℃冰櫃，24小時內測定。若需長時間保存，則應凍存於-20℃以下，避免反覆凍融。上述樣品使用前應恢復到室溫，輕輕搖動混勻。若標本有沉澱物形成，應離心除去，並確定未變質方可使用。嚴重溶血或脂血標本不能使用。
檢驗方法
*實驗前準備
1．取出試劑盒及待測樣品．將所有試劑及樣品恢復至室溫（18-25℃）。
2．將恆溫箱或水浴鍋調至反應溫度。
3．洗液用蒸餾水作20倍稀釋後備用。
*實驗步驟
1．取出一定量的包被孔，編號。留一孔作空白對照、其餘加入陰性對照三孔和陽性對照二孔50μl/孔及待測標本50μl/孔於相應的反應孔內。
2．貼上板貼．置37℃溫箱中孵育30分鐘。
3．撕下板貼，甩去孔內液體。洗板6次，最後在吸水紙上拍乾。
4．每孔分別加入酶結合物50μl (空白對照孔不加)，貼上板貼。
5．置37℃溫箱中孵育30分鐘。
6．撕下板貼．甩去孔內液體，洗板6次，最後在吸水紙上拍乾。
7．每孔加入底物液、顯色劑各50μl．37℃避光溫育10分鐘。
8．加終止液50μl/孔，輕輕振盪混勻後，立即測試結果。
9．使用酶標儀測量。單波長測定．以空白孔調零，450nm測定各孔的OD值：或直接採用450nm/(620nm-630nm)雙波長測定各孔的OD值。
參考值
1．CUT OFFal=0.1+陰性對照孔平均OD值(若陰性對照孔OD值小於0.05時，應按0.05計算)
2．待測樣品OD值<CUT OFF值時，檢測呈陰性反應．報告HIV抗體陰性。
3．待測樣品OD值≥CUT OFF值時，檢測呈陽性反應-嚴格按照“全國愛滋病檢測技術規範”進行復檢及確認。
4．有效性判斷：陰性對照孔OD值應小於0.1，陽性對照孔OD值應大於0.7，陽性對照孔減陰性對照孔OD值大於0.6。否則應重新實驗。
檢驗結果解釋
1．本試劑盒檢測結果不是確認指標，檢測呈陰性反應的標本報告HIV抗體陰性；檢測呈陽性反應的標本應嚴格按照“全國愛滋病檢測技術規範”進行復檢及確認。
2．本試劑盒與其他廠家產品、不同檢測方法無直接可比性。
方法局限性
1．本品用於血清或血漿樣本的測定，用於其他體液樣本測定的可靠性尚未得到充分確認。
2．加熱處理過的標本、凍溶過的標本以及其他含有沉澱物的標本，使用前需離心5-10分鐘去除沉澱後用上清液進行檢測。
產品性能指標
1．陰性符合率：符合中國藥品生物製品檢定所的陰性參考品規定
2．陽性符合率：符合中國藥品生物製品檢定所的陽性參考品規定
3．精密度：符合中國藥品生物製品檢定所的精密度參考品規定
4．最低檢出量：符合中國藥品生物製品檢定所最低檢出量參考品規定
5．干擾因素：RF因子、高膽紅素、溶血、高脂等標本可能幹擾實驗，應避免
使用。
注意事項
1．試劑盒僅供體外診斷使用。操作前仔細閱讀使用說明書，嚴格按照試劑盒內說明書進行試驗操作，以保證結果可靠．重複性好。
2．本試劑盒中陰性對照和陽性對照含有人源性組分，實驗結束，用過的樣品及與人源性成分接觸過的物品仍應視為傳染性物質，廢棄處理時，請按照當地政府和相關國家規定執行。
3．從冷藏處取出的試劑盒組分及待測樣品，應恢復至室溫後使用。使用前試劑應搖勻，滴瓶應垂直滴加使用。
4．不同批號的試劑不能混用。
5．板貼不能重複使用。
6．待測標本不能使用含有NaN3防腐劑。
7．加樣槍頭不可混用．以免交叉污染。
8．孔內樣品需混合均勻，不能有氣泡存在。
9．嚴格控制每步反應時間和溫度，操作應緊湊。
10．洗滌要徹底，洗液應注滿每孔，但不可用水過猛。避免產生氣泡。每次洗滌均應甩乾孔內液體。最後應將孔內液體拍乾。
11．本試劑盒僅作診斷的輔助手段之一，僅供臨床醫生參考。
