《微生物對無指盤臭蛙皮膚分泌物抗菌肽表達譜的影響》是依託昆明理工大學，由宋玉竹擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：微生物對無指盤臭蛙皮膚分泌物抗菌肽表達譜的影響
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：宋玉竹
- 依託單位：昆明理工大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
抗生素耐藥是威脅公共安全的一個重大問題，生物天然免疫的重要分子- - 抗菌肽是一種極具潛力的新型抗菌藥物。然而抗菌肽的耐藥性問題、抗菌肽在生命體防禦系統中準確定位等問題未能得到解決。國內外研究表明抗菌肽的產生與微生物的威脅存在著極強的相關性；同時抗菌肽的協同作用也暗示了抗菌肽雞尾酒療法的可行性。在我們之前的研究中也發現抗菌肽的聯合作用對延緩微生物對抗菌肽的耐受有一定的作用。.本項目將從自然環境和實驗誘導兩個方面對無指盤臭蛙皮膚分泌物抗菌肽表達譜與微生物關係進行研究，以期為解釋抗菌肽生物多樣性提供一定的證據，並為抗菌肽類藥物的開發和套用提出新的思路，為進一步研究抗菌肽在生命體防禦系統中的作用及應對抗菌肽的耐藥性問題奠定基礎。
結題摘要
生物活性肽是機體防禦系統的重要組成部分，而兩棲動物皮膚是生物活性肽豐富的資源庫。在同一物種不同個體中生物活性肽的組成差別仍不清楚。本研究中，於中國雲南省昆明市和貴州省貴陽市收集黑斑蛙，以確定兩個地區之間採集的個體在生物活性肽組成上是否存在差異。通過篩選cDNA文庫鑑定了8種抗微生物肽和1種抗氧化肽。其中，三種抗菌肽（pelophylaxin2GY，temporin-1GY，temporin-1KM）和抗氧化肽antioxidin-PN是首次被報導。兩個地區採集的個體在生物活性肽表達譜上具有明顯差異：nigrocin-1、nigrocin-2和pelophylaxin-2在兩個地區採集的個體中均有表達；Pelophylaxin-2GY，temporin-1GY僅在貴陽採集的蛙中被發現，而antioxidin-PN、esculetin-1、esculetin-2和temporin-1KM僅在昆明採集的蛙中發現。之後利用RT-PCR法證實了這種差異。結果表明，不同棲息地採集的同一物種的生物活性肽具有明顯的差別。抗菌肽的產生可能與模式識別受體識別微生物或微生物成分有關。本項目的進行表明多肽的表達與某個地理區域中的環境因素有關。 刺激和調節兩棲類生物活性肽產生的因素仍不清楚。我們利用電刺激使黑斑蛙排空分泌物，將其飼養於含有不同微生物的環境，電刺激收集分泌物，冷凍乾燥保存後準備後續進行液相色譜-質譜聯用分析。同時在3周后取皮膚提取RNA進行逆轉錄，分析表達譜。結果顯示，nigrocin5家族抗菌肽在金黃色葡萄球菌刺激下表達增加，brevinin 2家族抗菌肽僅在大腸埃希菌刺激下表達；Nigrocin2家族抗菌肽在大腸埃希活菌刺激下表達明顯增加而在滅活大腸埃希菌中表達量無顯著變化。 本項目研究過程中，從自然環境和實驗誘導兩個方面對兩棲動物皮膚分泌物抗菌肽表達譜進行研究，為解釋抗菌肽生物多樣性提供一定的證據，並為抗菌肽類藥物的開發和套用提出新的思路，為進一步研究抗菌肽在生命體防禦系統中的作用及應對抗菌肽的耐藥性問題奠定基礎。 在項目的支持下，取得了預期成果。共發表文章8篇，其中SCI文章4篇，核心期刊4篇；申報國家發明專利3項，已授權1項。
