《微流控晶片用於快速篩選蛋白質的核酸適體》是依託湖南大學，由羊小海擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：微流控晶片用於快速篩選蛋白質的核酸適體
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：羊小海
- 依託單位：湖南大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
本項目針對傳統的核酸適體篩選過程中操作繁瑣、耗時費力等問題，集成微流控晶片和表面電漿共振（SPR）感測器的優勢，發展新的技術平台，實現多個目標物的核酸適體的快速、同時篩選，為核酸適體篩選過程的標準化、自動化、規模化打下堅實的基礎。具體研究內容包括（1）精確控制篩選的嚴謹度，達到最佳的篩選效率，（2）快速、同時篩選多個目標物的核酸適體，（3）寡核苷酸鏈與靶標的親和力的實時監測。具體實施將分為3步進行：（1）技術平台的構建，（2）技術平台的測試和最佳化，（3）多種蛋白質的核酸適體的同時篩選。本項目相關的關鍵技術已經得到了驗證，表明本項目的技術路線是可行的。
結題摘要
本項目在項目組全體人員的努力下，完成了以下工作：發展和改進了若干種篩選技術，以小分子、蛋白質、細胞為靶標，開展了核酸適體的篩選工作，包括：（1）設計製作了3種微流控晶片，快速篩選獲得了多西紫杉醇、C反應蛋白和肌紅蛋白的核酸適體；（2）以碳納米材料作為去除游離核酸的輔助材料，改進傳統的篩選方法，快速篩選獲得了蛋白質和腫瘤細胞的核酸適體；（3）通過控制篩選嚴謹度、最佳化核酸文庫和靶標的固定化方式，快速篩選獲得了蛋白質的核酸適體。以上核酸適體的親和力、特異性以及序列，採用SPR感測器、流式細胞儀以及單分子力譜技術進行考察及最佳化。同時，基於自行篩選的核酸適體以及文獻報導的部分核酸適體，發展了10種分析方法，實現了多種蛋白質和腫瘤的高靈敏、高特異性檢測。為了給核酸適體的套用提供更為豐富的信息，採用單分子力譜技術，考察了不同條件下核酸適體與靶標的相互作用。本項目立項以來已經在Analytical Chemistry、Chemical Communications、Biosensors and Bioelectronics等學術刊物上發表研究論文44篇（其中IF＞5的17篇）；申請國家發明專利11項，其中7項已獲得授權；培養博士4名、碩士20名。同時還積極開展學術交流活動，參加國際學術會議3次、全國性學術會議6次，其中應邀作分組報告4次；2014年暑期赴美國加利福尼亞大學河濱分校化學系Quan Jason Cheng教授課題組開展學術交流；將於2016年春季赴美國聖地亞哥參加“251st ACS National Meeting & Exposition”並作分會報告。綜上所述，我們為傳統的核酸適體篩選過程中操作繁瑣、耗時費力的問題提供了解決方案，獲得了多個目標物的核酸適體，為核酸適體篩選的標準化、自動化和規模化提供了基礎，達到了本項目的預期目標。
