《微流控晶片多元免疫分析用於前列腺癌的早期診斷》是依託蘭州大學，由王兆彥擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：微流控晶片多元免疫分析用於前列腺癌的早期診斷
- 依託單位：蘭州大學
- 項目負責人：王兆彥
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
前列腺癌是發生於男性前列腺組織中的惡性腫瘤，目前主要根據血液中前列腺特異性抗原的含量來進行診斷，但是此方法在特異性方面存在欠缺，經常出現假陰性和假陽性結果。本項目利用共價鍵合的方式，把前列腺特異性抗原、早期前列腺癌抗原和前列腺特異性膜抗原三種抗原的抗體，同時固定在通過光接枝方法用丙烯酸改性的環烯烴共聚物（COC）微流控晶片通道內，然後利用抗原-抗體反應對3種目標抗原進行捕獲，再用緩衝液洗去非目標物質，最後用洗脫液把結合的抗原洗脫下來,引入分離通道並進行分離檢測。本方法是微流控晶片技術與免疫分析的結合，既保留了普通免疫分析高靈敏度和高選擇性的優點，又克服了其分析時間長、不能用於多標記物同時檢測等缺點。通過對3種前列腺癌標記物的同時檢測，提高了診斷的靈敏度和特異性，並為前列腺癌現場即時診斷提供了可能性。
結題摘要
前列腺癌是發生於男性前列腺組織中的惡性腫瘤，目前主要根據血液中前列腺特異性抗原的含量來進行診斷，但是此方法在特異性方面存在欠缺，經常出現假陰性和假陽性結果。本項目利用共價鍵合的方式把三種抗原的抗體同時固定在微流控晶片通道內，然後利用抗原-抗體反應對3種目標抗原進行捕獲，再用洗脫液把結合的抗原洗脫下來,引入分離通道並進行分離檢測。在項目的完成過程中，我們首先對具有多功能區域的晶片進行了設計製作，研究表明利用雕刻法可成功用於複雜結構晶片的製作，且通過流體的控制，可有效的實現目標液體的定向流動。在此基礎上我們還設計製作了製作方法簡單、操作要求低、成本低廉的微流控晶片-石英毛細管雜合體系，該雜合體既能滿足樣品複雜預處理過程，也克服了由於晶片體系分離通道相對較短，檢測方式受限較多的問題。為了克服蛋白在微通道內的吸附問題，我們考察了一系列的添加劑對吸附的抑制作用，研究過程中發現通過採用稀釋一定倍數的血清或者全血直接沖洗毛細管，可在管道內壁形成穩定的塗層，從而有效的抑制吸附。此方法不僅操作簡單，而且具有很好的重複性，對於血液樣品中的待測組分分析研究，具有很好的實用價值。接下來，我們利用共價鍵和的方式對抗體進行固定。首先，通過將含有引發劑二苯甲酮的丙烯酸單體引入抗體固定通道，經紫外照射使丙烯酸鍵合於COC通道表面，然後引入EDC和NHS對晶片表面的羧基進行活化，然後通入目標抗體，抗體即可鍵合於晶片通道表面。實驗結果表明，此方法固定的抗體穩定性較好，且固定的量與抗體濃度正相關。另外，為了控制抗體固定的區域，我們通過鋁箔對晶片進行區域掩蔽，即可實現特定區域的抗體固定。最後，我們對抗原抗體的進行了初步的分離檢測。此項目的研究首先為複雜晶片尤其是晶片與毛細管雜合體系的製作提供了新的方法，而且成功實現了抗體在通道內的有效固定，為以後的微流控晶片免疫分析提供數據支持。
